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科研時節(jié)忙碌紛紛 ELISA準確性這樣驗證
閱讀：1385 發(fā)布時間：2015-1-14本學(xué)期就要結(jié)束了，科研時節(jié)忙碌紛紛，不少客戶們正在準備即將開始的實驗與春節(jié)后的試劑盒預(yù)購。ELISA實驗得以大家的喜愛是因為其有著高靈敏、高特異性、準確性好等特點。
近日，我公司何在售后服務(wù)問題處理過程中，接到了曹老師的，曹老師說：“ELISA方法的準確性一般會用LC、LC-MS或者LC-MSMS做驗證，因為我的方法涉及到小分子藥物的衍生測定，所以液相的方法達不到回收率，請問有沒有其他的方法可以用來驗證ELISA方法的準確性呢？有沒有這種可能是我的藥物衍生體系本身這種方法與液相的流動相沖突，不適合用液相去測定？"
對曹老師的疑問，上海恒遠技術(shù)專員做出的細致的分析：
通常用ELISA方法檢驗出來的陽性樣品，需要用LC、LC-MS、GC-MS或者LC-MSMS做確證，因為ELISA方法的存在約5%左右的假陽性。究竟用上述的哪一種方法去確證其準確性，是要根據(jù)被測組分的理化性質(zhì)決定的，例如組分在300度也不能夠汽化，肯定不能用GC-MS；組分結(jié)構(gòu)中有共軛，存在 n→π躍遷,π→π躍遷，一般會用HPLC紫外檢測器；若組分具有熒光或者通過衍生化反應(yīng)可以定量產(chǎn)生具有熒光的物質(zhì)，則會用HPLC熒光檢測器。以此類推，究竟用什么方法確證取決于被測組分的理化性質(zhì)，而不是憑空想象。