化工儀器網
技術文章
上海恒遠為您解說二抗的主要應用
閱讀：1076 發(fā)布時間：2015-7-13如今的科研事業(yè)越為廣泛，實驗室抗體試劑的應用發(fā)展也越來越好。今天上海恒遠為您解說二抗的主要應用，還包括了了二抗的選擇，一起來看下：
1.二抗的主要應用
可以應用到幾乎所有類型的免疫檢測中，尤其是Western blot、免疫組織化學和免疫細胞化學。
事實上，二抗在Elisa及流式細胞術中應用也很廣泛，不僅用于科學研究，而且廣泛的應用于臨床分析和疾病診斷。比較而言，二抗在免疫沉淀中的應用相對較少。以下內容是基于對所收集的二抗信息進行統(tǒng)計分析后得出的一些結論，對于您在具體的實驗中如何選擇的抗體具有借鑒作用。
2.選擇二抗的方法
①考慮因素：有一抗的物種、產生二抗的宿主、一抗的類別或亞類、二抗所耦聯(lián)的探針類型及二抗的形式等等。因此選擇哪種類型的二抗很大程度上決定于您所使用的一抗是什么，尤其針對種屬和類別而言。
②與一抗的：通常情況下，一抗可以在山羊、小鼠、兔子、大鼠及綿羊體內制備，其中屬小鼠及兔子zui為常見，相應的，二抗的種屬也應當與一抗的相一致。而對于制備二抗的宿主，則應選擇另外一種不同的動物，一般選用驢、山羊、兔子、綿羊或其他較大的動物，可以實現(xiàn)二抗的大規(guī)模制備，其中又屬山羊使用zui多。
③二抗類別或亞類的選擇：應遵循與一抗類別或亞類相一致的原則，其中抗IgG使用zui多。這可能是因為除了五種類別的單克隆抗體外，很多一抗是多克隆抗體，屬于IgG類免疫球蛋白。此外anti-IgG可以識別幾乎所有類型的IgG亞類，因此，在不清楚一抗是屬于那個類別或亞類的時候，anti-IgG抗體是個不錯的選擇。
此外，整個IgG分子是zui常用的一種二抗分子形式，而F(ab’)2片段或Fab片段一般僅用于特殊實驗中，如需要避免抗體與具有Fc受體的細胞結合的情況，或需要封閉內源性免疫球蛋白的時候。
由于Elisa二抗所具備的優(yōu)點使得其在免疫學實驗中得以應用廣泛。對于二抗所耦聯(lián)的探針的選擇，主要取決于具體的實驗。對于Western blot，zui常用的探針是HRP。