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技術(shù)文章

J亞群禽白血病抗體抗體檢測(cè)方法

閱讀:1780          發(fā)布時(shí)間:2016-5-18

                        J亞群禽白血病抗體抗體檢測(cè)方法

亞群禽白血病是由, 亞群禽白血病病毒(J.\N/-.O , 04(0) 1*.:-+(+ 4(/.+,KH6A,)引起的一種主要導(dǎo)致肉用型雞發(fā)生髓細(xì)胞瘤的傳染病,該病自=>>= 年由307)* 在英國(guó)發(fā)現(xiàn)并報(bào)道以來(lái)[=],在世界范圍內(nèi)廣泛流行,目前已遍布世界上所有的養(yǎng)雞國(guó)家,其中在美國(guó)、英國(guó)等國(guó)家肉種雞群中的感染率接近%$ ‘,給世界養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。我國(guó)自=>>> 年從市場(chǎng)上商品代肉雞中分離并檢出了KH6A,,現(xiàn)已在山東、江蘇、河南、寧夏、內(nèi)蒙、吉林、黑龍江等省市分離到了多個(gè)KH6A, 病毒流行株[! ? #]。勿庸置疑,我國(guó)已經(jīng)受到, 亞群禽白血病威脅,并造成了嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。

    亞群禽白血病在雞群中不僅可以水平傳播還可垂直傳播,導(dǎo)致感染雞群的死亡率升高、產(chǎn)蛋量下降、發(fā)生免疫抑制、帶來(lái)直接危害,另外免疫抑制還可嚴(yán)重影響禽流感等禽類烈性傳染病的免疫預(yù)防效果,降低禽只對(duì)各種病原體的抵抗力,從而引發(fā)更為嚴(yán)重的危害。因此,自該病在國(guó)內(nèi)不同地區(qū)出現(xiàn)和流行以來(lái),就引起了獸醫(yī)工作者和養(yǎng)禽生產(chǎn)者的高度重視。目前,現(xiàn)地生產(chǎn)中急需開(kāi)展該病普查和凈化的技術(shù)手段。雖然,國(guó)外用于檢測(cè),)0 : 2 囊膜蛋白$%&’ 的血清學(xué)診斷試劑盒已經(jīng)商品化,但是因?yàn)?%&’ 存在著極為普遍的抗原變異,世界各地區(qū),)0 : 2 分離株$%&’ 的分子變異規(guī)律不盡相同,不能確保來(lái)自國(guó)外的血清學(xué)試劑盒在中國(guó)境內(nèi)使用的效果,zui不容忽視的問(wèn)題是國(guó)外試劑盒價(jià)格昂貴,使用成本較高,不易在國(guó)內(nèi)大范圍推廣使用。為了解決上述問(wèn)題,本研究立足國(guó)內(nèi)生產(chǎn)需求,開(kāi)展國(guó)內(nèi)分離毒株$%&’ 的表達(dá)和純化研究,并以其為抗原,建立了用于檢測(cè),)0 : 2 的血清學(xué)()*+, 診斷方法。
    本研究建立的()*+, 診斷方法,經(jīng)交叉試驗(yàn)證實(shí),具有良好的特異性,與其他禽類常見(jiàn)疫病的
陽(yáng)性血清無(wú)交叉反應(yīng),特異性好;批內(nèi)和批間重復(fù)試驗(yàn)證實(shí),抗體水平不同的各種血清樣品、在不同
時(shí)間進(jìn)行檢測(cè)的;< 值變異程度不大,重復(fù)性和穩(wěn)定性較好。3"3 敏感性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明,+./ 雞攻毒后#- =即可檢測(cè)到()*+, 抗體,直到實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到的第&’天仍然可檢測(cè)到抗體。檢測(cè)敏感性與國(guó)外試劑盒一致。
    經(jīng)對(duì)現(xiàn)地4 份血清樣品測(cè)定結(jié)果表明,()*+, 診斷方法與國(guó)外商品化試劑盒在不同雞群中的符合率zui低可達(dá)&7"4 9,zui高達(dá)到8’" ’ 9,符合率較好。3"’ 目前已有的研究結(jié)果及現(xiàn)地應(yīng)用效果表明,本研究建立的間接()*+, 抗體檢測(cè)方法,具有特異、敏感、適用、成本合理等特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)。隨著技術(shù)手段的進(jìn)一步完善、試劑盒組裝技術(shù)的開(kāi)發(fā)和利用,2 亞群禽白血病()*+, 診斷方法將為國(guó)內(nèi)
各養(yǎng)雞廠有效開(kāi)展2 亞群禽白血病血清學(xué)調(diào)查提供有效的技術(shù)手段。同時(shí),結(jié)合相應(yīng)的病原學(xué)診斷方法,該方法也必將在也必將在2 亞群禽白血病的凈化中發(fā)揮巨大的作用。

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