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ELISA實驗中給檢測樣本加樣的步驟詳解

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ELISA實驗中給檢測樣本加樣的步驟詳解:

    1.細胞上清:前處理必須是細胞離心去除,每孔直接加100μl即可。如果濃度太高需稀釋時,用標準品稀釋液直接稀釋。

    2.腦脊液:前處理必須是細胞離心去除,每孔直接加100μl即可。如果濃度太高需稀釋時,用標準品稀釋液直接稀釋。

    3.血清血漿:加入50 ul樣本分析緩沖液后加50 ul標本,如稀釋量大,請將樣本與樣本分析緩沖液等量加入,不足部分用標準品稀釋液補充至100ul。

    ①血清標本應(yīng)是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;

    ②血漿標本,推薦用EDTA的方法收集若待測樣本不能及時檢測,標本收集后請分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融。

    ③血清標本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑;

    ④標本應(yīng)清澈透明,檢測前樣本中如有懸浮物應(yīng)通過離心去除。

    ⑤請勿使用溶血,高血脂或污染的標本檢測,否則結(jié)果將不準確。

    4.組織勻漿液的樣本:要制備過程中需要在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑,防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解,造成檢測結(jié)果的值偏低。因組織勻漿液的樣本蛋白種類多,含量豐富,實驗參照血清血漿標本的處理方法進行,否則就會影響實驗結(jié)果。具體是加入50 ul樣本分析緩沖液后加50 ul標本,需稀釋時,請將樣本與樣本分析緩沖液等量加入,不足部分用標準品稀釋液補充至100ul。

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