詳細介紹
人二肽基肽酶Ⅳ (DPPⅣ) 操作步驟(中文)
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
8 ng/L | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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4 ng/L | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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2 ng/L | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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1 ng/L | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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0.5 ng/L | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、 | |||
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后 | |||
再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸 | |||
及孔壁,輕輕晃動混勻。 | |||
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 | |||
4.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用 | |||
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復 | |||
5次,拍干。 | |||
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 | |||
7.溫育:操作同3。 | |||
8.洗滌:操作同5。 | |||
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. | |||
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 | |||
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后 | |||
15分鐘以內進行。 |
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elisa試劑盒 elisa檢測
樣品收集、處理及保存方法:
1、 血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存……如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。