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技術文章

恒遠解析:一抗孵育的起始條件及孵育的優化

閱讀:5659          發布時間:2018-3-20

    實驗的所有步驟都必須經過優化,以便觀察到特異染色,并盡可能減少非特異的背景染色。這包括開展預實驗,以確定每個一抗的適當孵育條件。抗原親和純化的多克隆抗體的稀釋度通常低于單克隆抗體,但這些值必須根據經驗確定。
注意:為了獲得可靠特異的信號,應采用交叉反應性極少的高質量抗體。
1、一抗孵育的起始條件:


2、一抗孵育的優化:
   一抗濃度、稀釋液、孵育時間和溫度都影響了染色質量。這些變量需要針對每個抗體和樣品來優化,以便實現特異染色和低背景。優化通常是保持孵育時間和溫度不變,而改變抗體濃度,以確定何時獲得*信號和低背景噪音。例如,如果使用高親和力的抗體,那么相對較高的濃度可能需要較短的孵育時間。相反,較低的抗體濃度可能需要較長的孵育時間。人們通常采用較長的孵育時間,以確保抗體*滲透到體視學技術所用的組織切片。為了促進特異染色,較長時間的孵育通常在低溫下開展(即4°C vs 室溫)。
    上海恒遠生物科技有限公司坐落于美麗的上海,于2008年成立,是一家生物技術企業,主要從事免疫學、分子生物學和常規生化試劑的研發及銷售。主要產品有進口BIM/RD/TSZ ELISA試劑盒、NQBB/GIBCO/HYCLONE 血清、ABCAM抗體、SIGMA/SPECTRUM/AMRESCO 生物科研試劑、USP標準品、實驗耗材等。公司自成立以來一直以質量求生存,以信譽求發展的精神,精益求精,力求做到更好,全體員工孜孜不倦為國內科研事業單位以及高校等提供的產品服務!

                          

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