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恒遠(yuǎn)生物|人羊膜細(xì)胞(WISH)培養(yǎng)建議
閱讀：616 發(fā)布時(shí)間：2023-5-24品牌: 恒遠(yuǎn)生物
貨號: HYCC10347
中文名稱: 人羊膜細(xì)胞；WISH
規(guī)格: T25
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 最初以為這株細(xì)胞的起源是正常羊膜，但隨后通過同工酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋法分析，證實(shí)該細(xì)胞是HeLa細(xì)胞污染的；角蛋白陽性。
培養(yǎng)條件: DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法: 1：2~1:4傳代，每周2~3次。
凍存條件: 無血清細(xì)胞凍存液
一、細(xì)胞培養(yǎng)常見問題解答
1.培養(yǎng)基為什么一般都是偏紅色?
因?yàn)榕囵B(yǎng)基加了酚紅來顯示顏色，指示pH范圍為6-8，顏色會(huì)由黃變?yōu)樽霞t。這是為了我們能更直觀觀察培養(yǎng)液的變化，如變黃，則代表偏酸，偏堿性了就顯示偏紫色。一般來說，細(xì)胞吸收營養(yǎng)后，變黃后就暗示我們要換培養(yǎng)基啦!所以密切觀察很重要哦!
2.細(xì)胞的居住環(huán)境
舒適無菌的環(huán)境是細(xì)胞健康生活的重要基礎(chǔ)。如下圖為培養(yǎng)細(xì)胞的器皿，包括形狀、規(guī)格、用途多樣的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿及培養(yǎng)板。最終住進(jìn)37℃，5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱。
3.細(xì)胞培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶區(qū)別?
就細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)來說，培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿沒有太大區(qū)別，主要在于安全系數(shù)(培養(yǎng)瓶>培養(yǎng)皿)、培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)量(大培養(yǎng)瓶>培養(yǎng)皿)。但是培養(yǎng)瓶成本也會(huì)相對較高，因此無特殊要求，一般選擇培養(yǎng)皿即可。
4.為什么細(xì)胞復(fù)蘇后，很多難以貼壁?
忽略培養(yǎng)基的問題，主要考慮細(xì)胞凍存時(shí)狀態(tài)差或者復(fù)蘇時(shí)動(dòng)作太慢導(dǎo)致細(xì)胞死亡。切記最重要的融化速度要快，可不時(shí)搖動(dòng)冷凍管，使之盡快通過最易受損的溫度段(-5～0℃)。
5.細(xì)胞凍存時(shí)對細(xì)胞量有要求嗎?
細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)會(huì)有一定的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，起始濃度106—107個(gè)/ml/管。
6.細(xì)胞污染怎么辦?
如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染，一般建議丟棄。如果細(xì)胞非常寶貴，可試著加入含抗生素的培養(yǎng)基反復(fù)清洗，并用抗生素含量高的培養(yǎng)基培養(yǎng)，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。
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