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7月盛夏“熱”點聚交之大鼠內皮素1ELISA試劑盒
閱讀：1013 發布時間：2014-7-11ELISA試劑盒是我們公司主營產品，種屬標本齊全, 有人ELISA試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒，豬ELISA試劑盒，猴子ELISA試劑盒，兔ELISA試劑盒，雞ELISA試劑盒，魚ELISA試劑盒等等。有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒；我們的試劑盒是美國RD進口分裝的，（國產跟*的都有）價格實惠且質量保證，售前，售中，售后提供技術指導，購買我們的試劑盒還可享受免費代測的服務。
大鼠內皮素1試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍：
8μg/L -200μg/L
使用目的：
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中內皮素1(ET-1)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠內皮素1(ET-1)水平。用純化的大鼠內皮素1(ET-1)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入內皮素1(ET-1)，再與HRP標記的內皮素1(ET-1)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內皮素1(ET-1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠內皮素1(ET-1)濃度。
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
- 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
200μg/L | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
100μg/L | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
50μg/L l | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
25μg/L | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
12.5μg/L | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
- 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
- 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
- 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
- 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
- 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
- 溫育：操作同3。
- 洗滌：操作同5。
- 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
- 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
- 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
- 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月
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