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去甲腎上腺素ELISA試劑盒使用說明書
閱讀：1020 發布時間：2014-11-18去甲腎上腺素ELISA試劑盒使用說明書
(上海恒遠生物科技有限公司)
1、應用范圍
此試劑盒可用于人血清和尿液中去甲腎上腺素的體外定量檢測。
2、臨床意義
兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質、交感神經系統和大腦產生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經系統一起參與各種生理過程的調節。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經系統腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細胞瘤的診斷，當然也用于成神經細胞瘤和神經節細胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟，用戶可使用各種動物材料進行實驗。所有動物的兒茶酚胺的化學結構相同，因此此試劑盒可用于測大鼠、小鼠或其它動物。
3、實驗原理
此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態抗體可以結合到抗原分子的一個抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內結合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標二抗一起在微孔內溫育，此酶標二抗可結合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結果可直接從標準曲線上讀取。
4、貯存與穩定性
試劑盒和運輸環境和儲存環境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩定性及試劑的準備將在相關章節中闡述。開封的試劑盒在有效期內穩定，前提是將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環境下。
5、樣品的采集與儲存
注意 | 人體內的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內病人應禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMT抑制劑，還有降血壓類藥物。 |
血漿（EDTA）
注意 | 血液采集后兩小時內，將血液樣品冷藏于2-8℃的環境下直致離心獲取血漿。 | |||
注意靜脈穿刺采集全血的常規注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現混濁，則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質。 | ||||
貯存 | 2-8℃ | ≤-20℃ | 避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態下運輸樣品。 | |
穩定性 | 6h | 1個月 | ||
尿液
可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml 6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。 | ||
貯存 | ≤-20℃ | 避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態下運輸樣品。 |
穩定性 | 6個月 | |
6、試劑盒成分
注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分
數量 | 標志 | 成分 |
1×12×8 | MTP | 包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克隆）。 |
1×6×2.5ml | CAL A-F | 標準品A-F，即用 腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml (0;8;27;82;273;819nmol/L) 去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL (0;30;89;296;887;2955nmol/L) 多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL (0;78;228;750;2938;14688nmol/L) 內含[-]腎上腺素， [-]去甲腎上腺素， [-]多巴胺(有生物活性), 0.1M的HCl |
1×2×2.5ml | CONTROL 1+2 | 質控品1+2 即用,含: [-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素， [-]多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl, 具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽. |
1×250μL | ENZCONJ CONC | 酶聯物 濃縮型（100×） 內含：堿性磷酸酶標記的抗體，Tris緩沖液， HCl，0.01%的NaN3 |
2× | EXTRPLATE | 提取板（微孔板） 每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。 |
1×60ml | EXTRBUF | 提取緩沖液 粉紅色，即用，內含：0.016%的NaN3 |
2×1.25ml | COMT LYO | COMT凍干粉 內含:兒茶酚-氧位-甲基轉移酶（豬肝），NaN3 |
1×2ml | COMT ADD | COMT添加劑 內含:人血漿，穩定劑，0.01%硫柳汞。 |
1×7ml | ANTISERUM DO | 去甲腎上腺素抗血清 紫羅蘭色，即用， 內含:抗去甲腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩定劑。 |
2×1.25ml | COENZ | 酶聯復合物 即用，內含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩定劑。 |
1×3ml | ENZBUF | 酶緩沖液 即用，內含：Tris緩沖液，HCl，穩定劑。 |
1×17ml | RELEASEBUF | Release緩沖液 黃色，即用，內含：0.1M的HCl，指示劑。 |
1×3ml | ACYLREAG | 酰化試劑 即用，內含：二甲基甲酰胺，乙醇。 注意：有毒，高可燃性。 |
1×50ml | WASHBUR CONC | 洗滌液 濃縮型（10×） 內含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN3 |
1×9× | PNPP SUBS | PNPP底物片 內含：對硝基苯磷酸（PNPP） |
1×27ml | PNPP BUF | PNPP底物緩沖液 即用，內含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN3 |
1×15ml | PNPP STOP | PNPP終止液 即用，內含：1M的NaOH，0.25M的EDTA |
3× | FOIL | 粘性金屬板
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