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技術文章

您知道四合一檢測試劑樣本一系列處理方法?

閱讀:1725          發布時間:2014-11-25

上海恒遠生物技術動態解析:由我司技術人員經過不斷實驗和調試,精心研發生產出的呋喃四類代謝物(呋喃西林,呋喃妥因,呋喃它酮,呋喃唑酮)四種免疫試劑盒的樣本:組 織(雞、鴨肉/肝臟、魚、蝦)蜂蜜等前處理四合一檢測試劑盒已經成功上市。靈敏度0.05PPB,檢測限0.1PPB,回收率均能達到90%左右,且都是在25度反應,點板之前的所有操作步驟是一樣的,成為國內研制出真正意義上的“四合一”的廠家。此項改進,將大大縮短實驗員的的工作時間。那么您知道四合一檢測試劑樣本一系列處理方法?跟隨上海恒遠生物一起了解下呋喃四類代謝物免疫試劑的溶液的配制

樣本前處理需配制:

配液1:0.1M  K2HPO4 溶液

稱22.8g K2HPO4·3H2O加去離子水溶解定溶至1L

配液2:1M  HCL  

8.6mL濃HCL加去離子水定容至100mL

配液3:1M  NaOH溶液

        稱取4g NaOH,加去離子水定容至100ml。

配液4:復溶液1×

2×復溶液在使用前請按1:1稀釋(1份濃縮復溶液+1份去離子水)

配液5:洗滌液

將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水稀釋

20×濃縮洗滌液在使用前請按1:19稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水)(可按需配置)

呋喃四類代謝物樣本前處理方法

樣本處理前須知

    處理任何樣本時,都須注意:

(1)實驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時要更換吸頭。

   (2)實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈,必須使用潔凈實驗器具,以避免污染干擾實驗結果。

呋喃四類代謝物樣本處理步驟:

(A)組 織、蜂蜜(雞、鴨肉/肝臟、魚、蝦、等)

1、稱取1±0.05g均質樣于離心管中;

2、加入4ml去離子水,0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑充分振蕩;

3、在37℃過一夜孵育(約16小時)或56℃水浴孵育2小時;

4、分別加入5ml 0.1M K2HPO4 溶液,0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯,振蕩5分鐘;

5、室溫下4000轉/分,離心10分鐘; 

6、取出2.5ml的上層液到另一個離心管中,50℃水浴氮氣吹干;

7、 用1ml正已烷溶解殘留物,加入1ml復溶工作液充分振蕩混合30秒;室溫4000轉/分,離心5分鐘;

8、 取50μl下層用于分析。

(樣本稀釋倍數為2)


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