詳細介紹
ELISA試劑盒 ELISA檢測試劑盒 ELISA KIT
產品名稱:大鼠前列腺素F2α
英文名稱:Rat Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA KIT
使用范圍:科研
產品規格:96人份/48人份
各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標本齊全:血清、血漿、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液、關節液、胸腔溢液等…
經營品牌:美國RD RB IBL
保存條件:2-8℃
有效期:6個月
運輸條件:低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸。
大鼠前列腺素F2α ELISA技術操作要點,抗原和抗體
在ELISA實施過程中,抗原和抗體的質量是實驗是否成功的關鍵因素。本法要求所用抗原純度高,抗體效價高、親和力強。
ELISA所用抗原有三個來源:天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原。天然抗原取材于動物組織或體液、微生物培養物等,一般含有多種抗原成分,需經純化,提取出特定的抗原成分后才可應用,因此也稱提純抗原(purifiedantigen)。重組抗原(recombinantantigen)和多肽抗原(peptideantigen)均為人工合成品,使用安全,而且純度高,干擾物質少。因此雖然制備合成抗原有較高的技術難度且要求較為昂貴的儀器設備和試劑,其應用仍十分普遍,特別是對那些天然抗原不易得到的試驗,更顯出其獨到之處。
用于ELISA的抗體有多克隆的和單克隆的。抗血清成分復雜,應從中提取IgG才可用于包被固相或酶標記。含單克隆抗體的小鼠腹水中的特異性抗體含量較高,有時可適當稀釋后直接進行包被。制備酶結合物用的抗體的質量往往要求有較高的純度。經硫酸銨鹽析純化的IgG可進一步用各種分子篩層析提純。也可用親和層析法提純特異性IgG,如用酶消化IgG后提取的Fab片段,則效果更好。
ELISA技術操作要點,酶和底物
ELISA中所用的酶要求純度高、催化反應的轉化率高、專一性強、性質穩定、來源豐富、價格不貴、制備成的酶標抗體或抗原性質穩定,繼續保留著它的活性部分和催化能力。在受檢標本中不存在與標記酶相同的酶。另外它的相應底物應易于制備和保存,價格低廉,有色產物易于測定,光吸收高。ELISA中zui常用的酶為辣根過氧化酶(HRP)和從牛腸粘膜或大腸桿菌提取的堿性磷酸酶(AP)。
HRP在蔬菜作物辣根中含量很高,純化方法也不復雜。它是一種糖蛋白,含糖量約18%;分子量為44kD;是一種復合酶,由主酶(酶蛋白)和輔基(亞鐵血紅素)結合而成的一種卟啉蛋白質。主酶為無色糖蛋白,在275nm波長處有zui高吸收峰;輔基是深棕色的含鐵卟啉環,在403nm波長處有zui高吸收峰。