詳細介紹
elisa原理 檢測試劑盒 人表面膜免疫球蛋白M試劑盒
產品名稱:人表面膜免疫球蛋白M試劑盒
英文名稱:Human membrane IgM,mIgM ELISAKIT
產品規格:96人份/48人份
保存條件:2-8℃
檢測原理: 采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
實驗方法:酶聯免疫法/酶免法(ELISA)
測試劑盒檢測原理
ELISA檢測試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經第二次孵育后,酶結合物就會與*次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發生酶-底物反應,只有那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會發生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒 的測試標準, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
3.組織處理:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
ELISA所用抗原有三個來源:天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原。天然抗原取材于動物組織或體液、微生物培養物等,一般含有多種抗原成分,需經純化,提取出特定的抗原成分后才可應用,因此也稱提純抗原(purifiedantigen)。重組抗原(recombinantantigen)和多肽抗原(peptideantigen)均為人工合成品,使用安全,而且純度高,干擾物質少。因此雖然制備合成抗原有較高的技術難度且要求較為昂貴的儀器設備和試劑,其應用仍十分普遍,特別是對那些天然抗原不易得到的試驗,更顯出其獨到之處。
用于ELISA的抗體有多克隆的和單克隆的??寡宄煞謴碗s,應從中提取IgG才可用于包被固相或酶標記。含單克隆抗體的小鼠腹水中的特異性抗體含量較高,有時可適當稀釋后直接進行包被。制備酶結合物用的抗體的質量往往要求有較高的純度。經硫酸銨鹽析純化的IgG可進一步用各種分子篩層析提純。也可用親和層析法提純特異性IgG,如用酶消化IgG后提取的Fab片段,則效果更好。
上海恒遠生物技術有限公司經過數年的努力已迅速成為集科研和生產為一體的專業化生物工程公司。特別是ELISA研發這一產品已使上海恒遠成為中國公司。
公司產品涵蓋生物培養基、人ELISA試劑盒、小鼠ELISA試劑盒、大鼠ELISA試劑盒、ELISA研發、細胞培養,各種生化試劑、各種酶類、分子生物學試劑盒、培養基等。此外、上海恒遠還代理了Amresco,R&D,RB,sigma,IBL,Santa cruz,wako,omega,ATCC,ScienCell,Bioworld,Spectrum等國外各類公司的產品。
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