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一、初識(shí)生物安全柜

生物安全柜可提供樣品和工作人員的雙重保護(hù)。過(guò)濾后的潔凈氣流從安全柜頂部吹下，通過(guò)工作區(qū)域,在到工作人員的呼吸區(qū)域前被俘獲。氣流在放將被過(guò)濾，一般情況下過(guò)濾后的空氣將被排回實(shí)驗(yàn)室或者通過(guò)排氣管道排出室外。

各生物安全等級(jí)適用的生物安全柜

實(shí)驗(yàn)室生物安全等級(jí)	應(yīng)用的生物安全等級(jí)	所能提供的保護(hù)
		人員	試驗(yàn)品	環(huán)境
1-3	I	可	否	可
1-3	II（A1,A2,B1,B2）	可	可	可
4	III	可	可	可

生物安全柜可分為一級(jí)、二級(jí)和三級(jí)三大類以滿足不同的生物研究和防疫要求。一級(jí)生物安全柜可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品。氣流原理和實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)櫥一樣，不同之處在于排氣口安裝有HEPA過(guò)濾器。所有類型的生物安全柜都在排氣和進(jìn)氣口使用HEPA過(guò)濾器。一級(jí)生物安全柜本身無(wú)風(fēng)機(jī)，依賴外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶動(dòng)氣流，由于不能保護(hù)柜內(nèi)
樣品，目前已較少使用。

二級(jí)生物安全柜是目前應(yīng)用的柜型。按照NSF49的中的規(guī)定，二級(jí)生物安全柜依照入口氣流風(fēng)速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個(gè)不同的型號(hào)：A1型，A2（原B3）型,B1和B2型。所有的二級(jí)生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和
樣品的保護(hù)。

A1型安全柜前窗氣流速度zui小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.38m/s。70%氣體通過(guò)HEPA過(guò)濾器再循環(huán)至工作區(qū)，30%的氣體通過(guò)排氣口過(guò)濾排除。

A2型安全柜前窗氣流速度zui小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.5m/s。70%氣體通過(guò)HEPA過(guò)濾器再循環(huán)至工作區(qū)，30%的氣體通過(guò)排氣口過(guò)濾排除。

二級(jí)B型生物安全柜均為連接排氣系統(tǒng)的安全柜。連接安全柜排氣導(dǎo)管的風(fēng)機(jī)連接緊急供應(yīng)電源，目的在斷電下仍可保持安全柜負(fù)壓，以免危險(xiǎn)氣體泄漏如實(shí)驗(yàn)室。其前窗氣流速度zui小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.5m/s（100fpm）。B1型70%氣體通過(guò)排氣口HEPA過(guò)濾器排除，30%的氣體通過(guò)供氣口HEPA過(guò)濾器再循環(huán)至工作區(qū)。B2型為全排型安全柜，無(wú)內(nèi)部循環(huán)氣流，可同時(shí)提供生物性和化學(xué)性的安全控制。

三級(jí)生物安全柜是為4級(jí)實(shí)驗(yàn)室生物安全等級(jí)而設(shè)計(jì)的，柜體*氣密，工作人員通過(guò)連接在柜體的手套進(jìn)行操作，俗稱手套箱（Golve box），試驗(yàn)品通過(guò)雙門(mén)的傳遞箱進(jìn)出安全柜以確保不受污染，適用于高風(fēng)險(xiǎn)的生物試驗(yàn)。

二級(jí)生物安全柜各柜體類型性能比

二、生物安全柜的認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)

在2000年5月，歐洲標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（CEN）頒布了生物安全柜歐洲標(biāo)準(zhǔn)EN12469:2000，正式替代了德國(guó)DIN 12950、英國(guó)BS5726和法國(guó)NF X-44-201等歐盟成員國(guó)生物安全柜的標(biāo)準(zhǔn)，成為歐盟區(qū)域內(nèi)生物安全柜的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。

NSF49在上世紀(jì)70年代就已經(jīng)出現(xiàn)，被*為目前生物安全柜領(lǐng)域zui完善的標(biāo)準(zhǔn)。在2002年，ANSI/NSF49正式獲得了美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)學(xué)會(huì)（American National Standard Institute,ANSI）的*認(rèn)可，成為美國(guó)生物安全柜的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。

NSF/ANSI49和EN12469是目前世界上zui通用的生物安全柜認(rèn)證，這兩種標(biāo)準(zhǔn)對(duì)安全柜性能分級(jí)、安全性能檢測(cè)都有詳細(xì)的說(shuō)明和要求。安全柜標(biāo)準(zhǔn)對(duì)規(guī)范安全柜市場(chǎng)，保護(hù)研究人員起到重要的作用。

若您希望了解更多關(guān)于這兩項(xiàng)生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)的信息，可以瀏覽以下文章：《生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)-歐盟EN12469:2000和美國(guó)NSF49:2002的比較》。

三、生物安全等級(jí)簡(jiǎn)介

生物安全等級(jí)P1

進(jìn)行試驗(yàn)研究用的物質(zhì)都是已知的,所有特性都已清楚并且已證明不會(huì)導(dǎo)致疾病的多種微生物物質(zhì)。研究通過(guò)日常的程序在公開(kāi)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)面上進(jìn)行。不需要有特殊需求的安全保護(hù)措施。操作人員只需經(jīng)過(guò)基本的實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)程序培訓(xùn)并且通常由科研人員指導(dǎo)，在這樣的環(huán)境下并不需要生物安全柜的存在。

生物安全等級(jí)P2

進(jìn)行試驗(yàn)研究用的物質(zhì)是一些已知的中等程度危險(xiǎn)性的并且與人類某些常見(jiàn)疾病相關(guān)的物質(zhì)。操作者必須經(jīng)過(guò)進(jìn)行相關(guān)研究的操作培訓(xùn)并且由專業(yè)科研人員指導(dǎo)。對(duì)于易于污染的物質(zhì)或者可能產(chǎn)生污染的情況進(jìn)行預(yù)先的處理準(zhǔn)備。一些可能涉及或者產(chǎn)生有害生物物質(zhì)的操作過(guò)程都應(yīng)該在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，在這些條件下使用二級(jí)的生物安全柜。

生物安全等級(jí)P3

進(jìn)行試驗(yàn)研究的物質(zhì)一般都是本土或者外來(lái)的有通過(guò)呼吸傳染使人們致病或者有生命危險(xiǎn)的可能的物質(zhì)。我們需要保護(hù)一切在周圍環(huán)境中等操作者免于暴露于這些有潛在危險(xiǎn)的物質(zhì)中。通常使用二級(jí)或者三級(jí)的生物安全柜是必需的。

生物安全等級(jí)P4

進(jìn)行試驗(yàn)研究的物質(zhì)是一些非常高危險(xiǎn)性并且可以致命的有毒物質(zhì)，可以通過(guò)空氣傳播并且現(xiàn)今并沒(méi)有有效的疫苗或者治療方法來(lái)處理。操作者必須經(jīng)過(guò)熟練的關(guān)于進(jìn)行這種非常高危險(xiǎn)性物質(zhì)研究的培訓(xùn)，并且應(yīng)該很熟悉一些相關(guān)操作，保護(hù)設(shè)施，實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)等等方面對(duì)于這些高危險(xiǎn)性物質(zhì)的預(yù)防。同時(shí)也必須由在此研究領(lǐng)域非常有經(jīng)驗(yàn)的科研人員進(jìn)行指導(dǎo)。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室的進(jìn)出應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格的進(jìn)行控制，實(shí)驗(yàn)室一定要單獨(dú)的建造或者建造在一棟大樓中于其他任何地方都分離開(kāi)的獨(dú)立房間內(nèi)，并且要求有詳細(xì)的關(guān)于研究的操作手冊(cè)進(jìn)行參考。在這樣的實(shí)驗(yàn)研究中三級(jí)的生物安全柜是必需的。

四、如何選擇生物安全柜（定購(gòu)指南）:

Q：我需要購(gòu)買(mǎi)的是生物安全柜還是超凈工作臺(tái)
A：超凈工作臺(tái)提供的是對(duì)樣品的保護(hù)，對(duì)操作者和環(huán)境是不提供保護(hù)的；廣義上的生物安全柜同時(shí)提供對(duì)操作者、環(huán)境和樣品的保護(hù)。所以，從您需要的保護(hù)情況上，可以得出正確的選擇；

Q：我應(yīng)該購(gòu)買(mǎi)哪種類型、防護(hù)級(jí)別的生物安全柜
A：一般來(lái)說(shuō)，除非需要做一些未知菌種和病毒和活體的研究需要使用三級(jí)生物安全柜，二級(jí)生物安全柜已經(jīng)能基本滿足我們的正常工作需要。對(duì)于不含有毒、放射性、揮發(fā)刺激性溶劑的樣品的實(shí)驗(yàn)，A1/A2（原B3）型生物安全柜就已經(jīng)滿足使用要求，對(duì)于醫(yī)院系統(tǒng)采購(gòu)，因?yàn)椴《炯熬N類別較復(fù)雜，而且實(shí)驗(yàn)條件變化大，建議使用B2全排型生物安全柜；

Q：如何評(píng)判一臺(tái)生物安全柜的好壞
A：生物安全柜主要是用來(lái)做生物危害性防護(hù)的，所以對(duì)操作者的保護(hù)考慮是評(píng)判產(chǎn)品好壞的主要依據(jù)。二級(jí)生物安全柜zui核心的技術(shù)是濾膜（包含濾膜材質(zhì)、濾膜截留效率、濾膜壽命）、風(fēng)路設(shè)計(jì)（包括前操作面的平衡、沉降風(fēng)速以及風(fēng)速的均一性、進(jìn)氣風(fēng)速、風(fēng)的垂直沉降形態(tài)）、報(bào)警設(shè)置（好的生物安全柜應(yīng)該包含低風(fēng)速報(bào)警、前窗錯(cuò)誤位置的報(bào)警、紫外連鎖裝置、B2全排機(jī)型還需要有外風(fēng)機(jī)連鎖裝置）和負(fù)壓保護(hù)（包含側(cè)壁負(fù)壓，背部負(fù)壓、頂部負(fù)壓）。所以通過(guò)上述指標(biāo)的比較可以知道生物安全柜的優(yōu)劣；

Q：為什么前操作面的平衡是一臺(tái)生物安全柜的重要指標(biāo)
A：二級(jí)生物安全柜都存在一個(gè)開(kāi)口的前操作面，便于操作的同時(shí)也帶來(lái)一個(gè)污染的可能，如果平衡不好，那么會(huì)產(chǎn)生這個(gè)區(qū)域的污染，就無(wú)法做到正常的避免外界進(jìn)入操作室污染樣品以及操作室外泄污染操作者防護(hù)，這樣就和生物安全柜的設(shè)計(jì)理念出現(xiàn)了本質(zhì)的偏差，所以說(shuō)，二級(jí)生物安全柜在前操作面的平衡問(wèn)題很關(guān)鍵；

Q：為什么報(bào)警裝置里面需要有低風(fēng)速報(bào)警一個(gè)內(nèi)容
A：在歐美地區(qū)，按照歐美的標(biāo)準(zhǔn)，每一臺(tái)生物安全柜都推薦做一次主要技術(shù)指標(biāo)的校檢。我們買(mǎi)回生物安全柜并使用一段時(shí)候以后，生物安全柜是否還處于對(duì)操作者、環(huán)境和樣品的正常保護(hù)，作為操作使用人員，我們是沒(méi)有辦法知道的，而一旦由于濾膜堆積而造成沉降風(fēng)速降低，就會(huì)產(chǎn)生樣品污染可能，如果進(jìn)風(fēng)風(fēng)速降低，那么就可能造成人員被污染。在現(xiàn)有的國(guó)情下，我們很難做到每年的技術(shù)校檢，因?yàn)榇嬖诓恍〉馁M(fèi)用，所以低風(fēng)速報(bào)警很重要；

Q：生物安全柜具有電動(dòng)前窗，是不是很方便，很好
A：錯(cuò)！在歐美地區(qū)，一個(gè)生物危害性實(shí)驗(yàn)室往往需要配置雙供電系統(tǒng)，避免一個(gè)供電系統(tǒng)出現(xiàn)故障時(shí)的生物危害性物質(zhì)外泄。在國(guó)內(nèi)，這樣的實(shí)驗(yàn)室配置很難獲得。所以電動(dòng)前窗一旦在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中停電，就會(huì)產(chǎn)生很大的危險(xiǎn)，造成無(wú)法彌補(bǔ)的損失！而且不論是電動(dòng)前窗還是手動(dòng)前窗，在操作時(shí)都是固定高度的，所以在生物安全柜上，電動(dòng)前窗意義不大并有危險(xiǎn)，可以說(shuō)百害無(wú)一益；

Q：生物安全柜的側(cè)壁負(fù)壓是什么意思
A：生物安全柜歐美標(biāo)準(zhǔn)不同，在側(cè)壁要求也不同，美洲產(chǎn)品都是不銹鋼側(cè)壁，并要求負(fù)壓腔來(lái)避免側(cè)壁泄漏污染可能，歐洲產(chǎn)品基本都采用玻璃側(cè)壁，沒(méi)有對(duì)側(cè)壁做負(fù)壓保護(hù)。由于柜體內(nèi)部操作室是正壓的，所以如果有殼體破損和泄漏點(diǎn)存在，就會(huì)產(chǎn)生向外的泄漏。因此在側(cè)壁和背板形成負(fù)壓保護(hù)可以有效降低泄漏的可能性；

Q：負(fù)壓保護(hù)腔如何來(lái)避免污染和交叉污染
A：好的設(shè)計(jì)會(huì)在結(jié)束工作后風(fēng)機(jī)可以進(jìn)一步進(jìn)行一段時(shí)間的空轉(zhuǎn)來(lái)潔凈消毒，如果沒(méi)有這個(gè)設(shè)計(jì)，操作者需要在實(shí)驗(yàn)操作結(jié)束后，將柜體繼續(xù)開(kāi)啟一定時(shí)間以zui大程度排出污染物。

Q：我們需要定購(gòu)一些什么附件
A：柜內(nèi)一般會(huì)需要使用一些用電設(shè)備，那么柜內(nèi)的防濺電源插座是需要的，而且由于目前國(guó)內(nèi)使用歐洲儀器比較普及，鑒于歐洲電源線的接地和我國(guó)的插座不相容，所以會(huì)在歐式儀器上產(chǎn)生一定的靜電，靜電會(huì)影響到生物安全柜內(nèi)垂直沉降的風(fēng)流，會(huì)有一定吸附作用，因此如果可能配置一個(gè)歐式防濺電源插座。由于柜體操作室內(nèi)部污染不是很大，zui大的污染在負(fù)壓保護(hù)腔內(nèi)，所以紫外燈系統(tǒng)可以考慮選配，來(lái)達(dá)到更好的滅菌消毒功能。分體設(shè)計(jì)的安全柜需要配支架；

除了了解安全柜各項(xiàng)性能指標(biāo)，zui快zui方便鑒別安全柜安全性能的方法是了解您購(gòu)買(mǎi)的安全柜是否獲得過(guò)以下幾項(xiàng)主要的安全柜認(rèn)證：
EN12469 （歐洲生物安全柜統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)）
NSF49 （美國(guó)生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)-二級(jí)生物安全柜）
AS2252.2 （澳洲生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)-二級(jí)生物安全柜） JIS K3800 （日本生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)）
在尋求生產(chǎn)商產(chǎn)品認(rèn)證的同時(shí)，用戶也許注意以下事項(xiàng)：
1. 當(dāng)生產(chǎn)商聲稱自己生產(chǎn)的安全柜符合某項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，可要求其出示證明-合法的認(rèn)證機(jī)構(gòu)所簽署的獨(dú)立檢測(cè)報(bào)告；
2. 一些標(biāo)準(zhǔn)可能與安全柜安全性能無(wú)直接關(guān)聯(lián)，例如生物安全柜生產(chǎn)商聲稱獲得ISO9001質(zhì)量認(rèn)證，而ISO9001并不會(huì)對(duì)安全柜性能進(jìn)行以上安全柜標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)；
3. 認(rèn)證必須是由獨(dú)立、合法的安全柜認(rèn)證機(jī)構(gòu)測(cè)試和頒布的；

五、生物安全柜柜內(nèi)操作主要注意事項(xiàng)：

1、緩慢移動(dòng)原則：為了避免影響正常的風(fēng)路狀態(tài)，柜內(nèi)操作時(shí)手應(yīng)該盡量平緩移動(dòng)

2、物品平行擺放原則：為了避免物品和物品之間的交叉污染現(xiàn)象產(chǎn)生，在柜內(nèi)擺放的物品應(yīng)該盡量呈橫向一字?jǐn)[開(kāi)，避免回風(fēng)過(guò)程中造成交叉污染。同時(shí)避免堵塞背部回風(fēng)隔柵影響正常風(fēng)路

3、避免震動(dòng)原則：柜內(nèi)盡量避免震動(dòng)儀器（例如離心機(jī)、旋渦振蕩器等）的使用，因?yàn)檎饎?dòng)會(huì)使得積留在濾膜上的顆粒物質(zhì)抖落，導(dǎo)致操作室內(nèi)部潔凈度降低，同時(shí)如果在前操作面平衡失敗還會(huì)引起安全柜對(duì)操作者的污染

4、不同樣品柜內(nèi)移動(dòng)原則：柜內(nèi)兩種及以上物品需要移動(dòng)時(shí)，一定遵循低污染性物品向高污染性物品移動(dòng)原則，避免污染性高的物品在移動(dòng)過(guò)程中產(chǎn)生對(duì)柜體內(nèi)部的大面積污染

5、明火使用原則：柜內(nèi)盡量不要使用明火！因?yàn)樵诿骰鹗褂眠^(guò)程中產(chǎn)生的細(xì)小顆粒雜質(zhì)將被帶入濾膜區(qū)域，這些高溫雜質(zhì)會(huì)損傷濾膜。無(wú)法避免一定需要使用的時(shí)候，宜使用低火苗的本生燈