生物安全柜操作及使用方法
閱讀:3626 發布時間:2012-4-20
1.生物安全柜的選擇
主要根據下列所需保護的類型來選擇適當的生物安全柜:實驗對象保護;操作危險度1~4級微生物時的個體防護;暴露于放射性核素和揮發性有毒化學品時的個體防護;或上述各種防護的不同組合。表1列出了每一種防護類型所推薦使用的生物安全柜。
操作揮發性或有毒化學品時,不應該使用將空氣重新循環排入房間的生物安全柜,即不與建筑物排風系統相連接的Ⅰ級生物安全柜,或Ⅱ級A1型及Ⅱ級A2型生物安全柜。Ⅱ級B1型安全柜可用于操作少量揮發性化學品和放射性核素。Ⅱ級B2型安全柜也稱為全排放型安全柜,在需要操作大量放射性核素和揮發性化學品時,必須使用這一類型的安全柜。
2.實驗室中生物安全柜的使用位置
空氣通過前面開口進入生物安全柜的速度大約為0.45 m/s。這樣速度的定向氣流是極易受到干擾的,包括人員走近生物安全柜所形成的氣流、打開窗戶、送風系統調整以及開關門等都可能造成影響。因此,zui為理想的是,生物安全柜應位于遠離人員活動、物品流動以及可能會擾亂氣流的地方。在安全柜的后方以及每一個側面要盡可能留有30 cm的空間,以利于對安全柜的維護。在安全柜的上面應留有30~35 cm的空間,以便準確測量空氣通過排風過濾器的速度,并便于排風過濾器的更換。
3.操作者
生物安全柜如果使用不當,其防護作用就可能大大受到影響。操作者在移動雙臂進出安全柜時,需要小心維持前面開口處氣流的完整性,雙臂應該垂直地緩慢進出前面的開口。手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約一分鐘,以使安全柜調整完畢并且讓里面的空氣“掃過”手和雙臂的表面以后,才可以開始對物品進行處理。要在開始實驗之前將所有必需的物品置于安全柜內,以盡可能減少雙臂進出前面開口的次數。
3.物品放置
Ⅱ級生物安全柜前面的進氣格柵不能被紙、儀器設備或其他物品阻擋。放入安全柜內的物品應采用70%酒精來清除表面污染。可以在消毒劑浸濕的毛巾上進行實驗,以吸收可能濺出的液滴。所有物品應盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺后緣的位置,并使其在操作中不會阻擋后部格柵。可產生氣溶膠的設備(例如混勻器、離心機等)應靠近安全柜的后部放置。像有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品,應該放在安全柜內的某一側。在工作臺面上的實驗操作應該按照從清潔區到污染區的方向進行。
耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤不應放在安全柜的外面,否則在使用這些物品時雙臂就必須頻繁進出安全柜,這樣會干擾安全柜空氣屏障的完整性,從而影響對人員和物品的防護。
安全柜內的空氣可以通過HEPA過濾器按下列方式排出:(a)排到實驗室中,然后再通過實驗室排風系統排到建筑物外面;(b)通過建筑物的排風系統排到建筑物外面;(c)直接排到建筑物外面。HEPA過濾器可以裝在生物安全柜的壓力排風系統(the exhaust plenum)里,也可以裝在建筑物的排風系統里。有些Ⅰ級生物安全柜裝有一體式排風扇,而其他的則是借助建筑物排風系統的排風扇。
Ⅰ級生物安全柜是zui早得到認可的,并且由于其設計簡單,目前仍在世界各地廣泛使用。Ⅰ級生物安全柜能夠為人員和環境提供保護,也可用于操作放射性核素和揮發性有毒化學品。但因未滅菌的房間空氣通過生物安全柜正面的開口處直接吹到工作臺面上,因此Ⅰ級生物安全柜對操作對象不能提供切實可靠的保護。
Ⅱ級生物安全柜在應用細胞和組織培養物來進行病毒繁殖或其他培養時,未經滅菌的房間空氣通過工作臺面是不符合要求的。Ⅱ級生物安全柜在設計上不但能提供個體防護,而且能保護工作臺面的物品不受房間空氣的污染。Ⅱ級生物安全柜有四種不同的類型(分別為A1、A2、B1和B2型),它們不同于Ⅰ級生物安全柜之處為,只讓經HEPA過濾的(無菌的)空氣流過工作臺面。Ⅱ級生物安全柜可用于操作危險度2級和3級的感染性物質。在使用正壓防護服的條件下,Ⅱ級生物安全柜也可用于操作危險度4級的感染性物質。