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大鼠ELISA試劑盒解決辦法
閱讀:347 發布時間:2017-10-13大鼠ELISA試劑盒解決辦法:
1 選擇試劑選擇質量優異的檢測試劑,嚴峻按照試劑闡明書進行操作,操作前將elisa試劑盒在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣可能原因:1)血清或血漿標本分別欠好即進行加樣;2)手工操作中,加樣板過多構成加樣后放入孵箱前等候時間過長;3)加完標本再加酶試劑時酶濺起孔外。解決辦法:1)標本為血清:將血液先天然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:有必要運用含抗凝劑的血液標本搜集管,采血后有必要當即倒置采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。2)加樣后及時放入孵箱。3)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。4)如果選用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。5)標本較多時,請分批操作。
3 孵育可能原因:1)孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸騰,吸附于孔壁,難于清洗*;2)孵育時間人為延伸,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:1)貼封片或加蓋;2)按闡明進程嚴峻控制操作時間。
4 洗板可能原因:1)選用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。2)選用半自動洗板機洗板時,洗液量缺少,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。3)反應板過多構成洗板等候時間長。解決辦法:1)保證洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙上輕輕拍干;2)合理安排,或多用幾臺洗板機。
5 顯色可能原因:1顯色劑后放置時間過長或運用過期顯色劑;2)加顯色劑時濺起孔外構成液體回流。解決辦法:1)顯色劑盡量在臨用前,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用;2)加樣時堅持顯色劑不外流;3)A、B液應避免接觸金屬器械。
6 中止可能原因如加中止液時發作較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加中止液時應避免發作氣泡。
7 讀板如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作進程中保證酶標板不接觸次氯酸;盡可能完結ELISA檢測標準自動化,有用前進檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優異elisa試劑盒外,有必要嚴峻按照操作進程進行操作,一同作好室內質控、室間質評,以慎重的工作作風檢測每一份標本,才華保證檢測質量。現在國內已有恰當數量的單位具有全自動酶標儀,這關于完結ELISA標準化檢測、前進檢測質量起到了重要效果。
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