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人ELISA試劑盒使用和處理中的常見問題
閱讀：328 發布時間：2018-4-25人ELISA試劑盒使用和處理中的常見問題
1.保存血清的方法
建議血清應保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。
2.如何解凍血清才不會使產品品質受損
將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規則地搖晃均勻。
3.血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現，該如何處理
血清中沉淀物的出現有許多種原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的品質。
欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內離心，上清液即可接著加入培養基內一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞您的過濾膜。
4.為什么要熱滅活血清
加熱可以滅活補體系統。啟動的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，啟動淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究，培養ES細胞，昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。
5.有必要做熱滅活嗎
實驗顯示，經過正確處理的熱滅活血清，對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的品質，而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，如同“小黑點”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。因此，除非必須，盡可能不需要做熱處理這一步。
6.為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現沉淀
儲存在2－8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應該不會影響血清的品質。建議在－20℃儲存胎牛血清，避免反復凍融。
7.如何避免沉淀物的產生
解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法（-20℃至4℃至室溫），若血清解凍時改變的溫度太大（如-20℃至37℃），實驗顯示非常容易產生沉淀物。 解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發生。 請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害，而影響血清的品質。 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。
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