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小鼠ELISA試劑盒實驗需要注意哪些問題
閱讀：462 發布時間：2018-4-28小鼠ELISA試劑盒實驗需要注意哪些問題
1．樣品稀釋
一般產品的樣品稀釋倍數均通過大量試驗確定,以保證試驗的靈敏度和特異性.酶聯免疫反應是一種敏感性很高的反應,如果血清不稀釋,不可避免會產生很強的非特異性反應,出現假陽性.
2．試劑盒平衡
Elisa中所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20～30分鐘以上.平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育時間相對縮短,ELISA反應不夠充分.冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘.
3．樣品和試劑的混勻
在稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性.
4．加樣
加樣是一項很重要的步驟.加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產生氣泡.加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性.加在孔壁上部的非包被區,易導致非特異吸附.
5．溫育
溫育是ELISA測定中影響測定成敗zui為關鍵的一個因素.ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結合反應在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結合,必須在一定的溫度條件下反應一定的時間.
6．洗板
固相免疫測定技術是一種非均相免疫測定技術,需以洗滌操作將特異結合于固相的抗原或抗體與反應溫育過程中吸附的非特異成份分離開來,以保證ELISA測定的特異性.洗液盡量不要溢出孔外；加洗液后要靜置1分鐘,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干；及時更換吸水紙,尤其是拍過酶標記物的吸水紙一定要棄去,否則可能影響試驗結果.
7．顯色
顯色一定要控制時間,根據試劑盒說明操作即可.一般來說,顯色時間過短,結果偏低；顯色時間過長,空白增高或者非特異性顯色增加.
8．比色
比色要注意波長的選擇.以TMB為底物和以OPD為底物的試劑盒均有使用,而前者比色波長為450nm,后者為492nm,濾光片需根據要求隨時更換.因此,容易出現濾光片錯用的問題.
小鼠ELISA試劑盒游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒 ，英文名： FE3 ELISA Kit
游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)ELISA試劑盒 ，英文名： f-βhCG ELISA Kit
幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： Hp-IgG ELISA Kit
幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒 ，英文名： Hp-IgM ELISA Kit
幽門螺桿菌細胞毒素相關基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： HP-CagA-IgG ELISA Kit
優球蛋白(EL)ELISA試劑盒 ，英文名： EL ELISA Kit
硬骨素(SOST)ELISA試劑盒 ，英文名： SOST ELISA Kit
印度刺猬因子(IHH)ELISA試劑盒 ，英文名： IHH ELISA Kit
隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)ELISA試劑盒 ，英文名： NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1 ELISA Kit
吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒 ，英文名： IDO ELISA Kit
音猬因子N端(Shh-N)ELISA試劑盒 ，英文名： Shh-N ELISA Kit
音猬因子(SHH)ELISA試劑盒 ，英文名： SHH ELISA Kit
抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒 ，英文名： Inhbb ELISA Kit
抑制素β-A(INHBA)ELISA試劑盒 ，英文名： INHBA ELISA Kit
抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒 ，英文名： INH-B ELISA Kit
抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 ，英文名： INH-A ELISA Kit
抑制素(INH)ELISA試劑盒 ，英文名： INH ELISA Kit
抑肽酶(AP)ELISA試劑盒 ，英文名： AP ELISA Kit
抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒 ，英文名： OSM ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白R(hnRNP R)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP R ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP P2 ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP M ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP L ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP K ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I/PTB)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP I/PTB ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP H ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP G ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP E ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP D ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP C ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP A3 ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP A2/B1 ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP A1 ELISA Kit
異質性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP A0 ELISA Kit
異質型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)ELISA試劑盒 ，英文名： hnRNP/RA33 ELISA Kit小鼠ELISA試劑盒