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小鼠ELISA試劑盒技術基礎知識講解
閱讀:533 發布時間:2018-5-23小鼠ELISA試劑盒技術基礎知識講解
酶免疫技術是以酶標記的抗體或抗原為主要試劑的方法,是標記免疫技術的一種。免疫技術是利用抗原抗體反應進行的檢測方法,即應用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑,以檢測標本中的相應抗體或抗原。它的特點是具有高度的特異性和敏感性。如將抗原或抗體用可以微量檢測的標記物(例如放射性核素、熒光素、酶等)進行標記,則在與標本中的相應抗體或抗原反應后,可以不必測定抗原抗體復合物本身,而測定復合物中的標記物,通過標記物的放大作用,進一步提高了免疫技術的敏感性。這種標記免疫技術一般分為兩類,一類用于組織切片或其他標本中抗原或抗體的定位;另一類用于液體標本中抗原或抗體的測定。前者屬于免疫組化技術范疇,后者則稱為免疫測定。
酶免疫測定根據抗原抗體反應后是否需要分離結合的與游離的酶標記物而分為均相和異相兩種類型,實際上所有的標記免疫測定均可分成這兩類。以標記抗體檢測標本中的抗原為例,按照簡單的形式是在試劑抗體過量的情況下進行,其反應式如下:
Ab*Ag代表結合的標記物, Ab*為游離的標記物。如在抗原反應后,先把Ab*Ag與Ab* 分離;然后測定Ab*Ag或Ab*中的標記物的量,從而推算出標本中的抗原量,這種方法稱為異相法。如在抗原抗體反應后Ab*Ag中的標記物* 失去其特性,例如酶失去其活力,熒光物質不顯熒光,則不需要進行Ab*Ag 與Ab*的分離,可以直接測定游離的Ab* 量,從而推算出標本中的Ag含量,這種方法稱為均相法。
在異相法中,抗原和抗體如在液體中反應,分離游離和結合的標記物的方法有許多種。與放射免疫測定相類似的液相異相酶免疫技測定,在某些激素等定量測定中也有應用。但常用的酶免疫測定法為固相酶免疫測定。其特點是將抗原或抗體制成固相制劑,這樣在與標本中抗體或抗原反應后,只需經過固相的洗滌,就可以達到抗原抗體復合物與其他物質的分離,大大簡化了操作步驟。這種被稱為小鼠ELISA試劑盒EL1SA 的檢測技術成為目前臨床檢驗中應用較廣的免疫測定方法。
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