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小鼠ELISA試劑盒操作中應(yīng)注意以下四個(gè)方面

閱讀:426          發(fā)布時(shí)間:2018-6-15

小鼠ELISA試劑盒操作中應(yīng)注意以下四個(gè)方面
1.隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響,某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動(dòng),因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理,例如對(duì)血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋,或離心分離血脂等。間接法測(cè)定中,標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2.加樣一般使用加液器,在中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時(shí)必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時(shí)則不需更換吸嘴。
3.在成批手工檢測(cè)中,還應(yīng)注意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異,使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間不一致,對(duì)競(jìng)爭(zhēng)法及定量檢測(cè)影響很大,不注意可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
4.洗滌是操作過(guò)程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物,終止抗原抗體反應(yīng),除去標(biāo)本中與反應(yīng)無(wú)關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過(guò)程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。
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