化工儀器網
技術文章
質粒小量提取試劑盒介紹
閱讀：321 發布時間：2020-1-3質粒小量提取試劑盒注意事項：
1、溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA 全部加入)，混勻，置于2-8℃保存。
2、第yi次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在漂洗液中加入無水乙 醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇 )。
3、使用前請先檢查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出現混濁，如有混濁現 象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，待溶液恢復澄清后再使用。
4、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用后應立即蓋緊蓋子，如非指明，所 有離心步驟均為使用臺式離心機 室溫下進行離心。
5、如果是提取革蘭氏陽性菌質粒，必須在裂解細胞前破細胞 壁，方法如下：收集適量菌體，加入250ul溶液Ⅰ，充分懸浮 菌體，加入溶菌酶至終濃度為10-20mg/ml，37℃處理30min 左右。加入溶菌酶的濃度和處理時間可根據不同的菌株和具體 試驗條件進行調整。
6、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul，體積過小會影響回收效 率；洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液 應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調至此范 圍)，pH值低于7.0會降低洗脫效率。
質粒小量提取試劑盒介紹:
本試劑盒采用堿裂解法裂解細胞，通過吸附柱在高鹽狀態下特異性地結合溶液中的DNA的特性提取質粒DNA。吸附柱中采用的硅基質材料能高效、專一地吸附DNA，可大限度去除雜質蛋白質及細胞中其他有機化合物。從1-5ml大腸桿菌LB培養液中，可快速提取5-15μg純凈地高拷貝質粒DNA，提取率達85-90％。使用本試劑盒提取的質粒DNA可適用于各種常規的分子生物學試驗，包括酶切、PCR、測序、連接和轉化等試驗。本試劑盒無需使用酚、氯fang等有毒試劑，操作安全。