化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
人ELISA試劑盒注意事項說明
閱讀：164 發(fā)布時間：2021-3-10人ELISA試劑盒標本收集：
1、血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2、血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3、尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4、細胞培養(yǎng)上清：
人ELISA試劑盒檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/ 分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并 放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5、組織標本：
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
人ELISA試劑盒注意事項：
1.確定人ELISA試劑盒在有效期內(nèi)；
2.仔細閱讀說明書；
3.按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）；
4.標本制備要規(guī)范，每份標本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存；
5.根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量；
6.準備好所有實驗額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機等；
7.按說明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑。