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人胚腎細胞使用注意方法
閱讀:220 發布時間:2021-3-23人胚腎細胞使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1、吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2、 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;
3、 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4、待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
人胚腎細胞注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 請用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件;建議使用派瑞金的*培養基。
4. 建議收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態。
5. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。