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用鑒定試劑盒做微生物生化鑒定操作流程與注意事項
閱讀：1815 發布時間：2021-5-17生化鑒定試劑盒HiBio-ID™，試劑盒包含生化鑒定卡、輔助試劑、結果詮釋表和標準菌種表。一個生化鑒定卡上集成了12種或24種生化試驗，將反應后的顯色結果與《結果詮釋表》、《菌種標準表》比對后，從而對菌種作出鑒定。
操作流程：
1，準備接種液
①待測菌株需要先分離純化。只有純化的菌株才能用于檢測。可用普通培養基如營養瓊脂（#M001）或適合的鑒別培養基分離菌株。（具體培養基以說明書為準）
②挑取單個菌落，接種到5ml腦心浸出液肉湯，在35-37℃培養4-6小時，直到菌液濁度達到產品說明書上的要求。一些苛養菌可能需要孵育6小時以上。在這種情況下，孵育應使接種液濁度達到OD值或McFarland濁度標準。
③遵循產品說明書的要求操作。
注意：如果接種液濁度＜0.1OD或0.5 McFarland標準，可能會得到錯誤的假陰性結果。
2，接種
①無菌打開試劑盒，撕去密封箔。
②采用表面接種方法，在鑒定卡上每孔加50μl上述接種液。每孔用接種環涂抹接種。
3，孵育
HiBio-ID™生化鑒定卡中，貨號為KB001--KB014的產品，均在35℃±2℃培養18-24小時，只有KB006例外，需在室溫（22-25℃）孵育48-72小時。
4，試劑
必要時需要添加其他顯色試劑，培養結束后，個別微孔需要加入1-2滴顯色劑，等待幾秒鐘或幾分鐘。顏色發生變化。
5，讀取結果
人工讀取結果：顯色結果與《結果詮釋表》比對，確定是否存在陽性反應。再根據《菌種標準表》完成鑒定/或用HiBio-ID™Readers生化鑒定儀鑒定。
注意事項：
1. 試驗前，將試劑盒從冰箱取出，放置在室溫。
2. 某些菌的糖發酵可能不顯著，這時可記錄為±，孵育延長至48小時。之后顯示為橘黃色則為陰性。
3. 對于賴氨酸和鳥氨酸脫羧試驗，孵育可能需要延長至48小時。
4. 如果菌種出現矛盾的結果，可能因為菌種突變或用于分離培養的培養基的緣故。