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淺談細胞轉染的途徑
閱讀:207 發(fā)布時間:2022-12-6細胞轉染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術。轉染,是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染的途徑大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類:
1、物理介導:
電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例。
2、化學介導:
方法很多,如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術。
3、生物介導:
方法有較為原始的原生質體轉染,和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。
理想細胞轉染方法,應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點。病毒介導的轉染技術,是目前轉染效率zui高的方法,同時具有細胞毒性很低的優(yōu)勢。但是,病毒轉染方法的準備程序復雜,常常對細胞類型有很強的選擇性,在一般實驗室中很難普及。其它物理和化學介導的轉染方法,則各有其特點。
需要指出的一點,無論采用哪種轉染技術,要獲得的轉染結果,可能都需要對轉染條件進行優(yōu)化。影響轉染效率的因素很多,從細胞類型、細胞培養(yǎng)條件和細胞生長狀態(tài),到轉染方法的操作細節(jié),都需要考慮。
應用:在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質等生物學試驗中。