化工儀器網
技術文章
ELISA試劑盒加樣品解決方法
閱讀：244 發布時間：2014-7-11近日山中伸彌領導的研究小組在的研究中對人類轉錄因子庫進行了高通量篩選，從中鑒別出了一種新型轉錄因子Glis1，用Glis1取代c-Myc，與Oct3/4, Sox2, Klf4一起誘導小鼠和人類成纖維細胞重編程為iPS細胞。并證實相比于c-Myc，Glis1誘導生成的iPS細胞具有較低的致癌性。這些iPS細胞形態與胚胎干細胞（ES）極為相似，且可表達與ES細胞相似的標記基因。當研究人員證實移植到裸鼠中的這些iPS細胞形成了畸胎瘤。在隨后的實驗中，研究人員證實Glis1高表達于未受精的卵母細胞和胚胎單細胞中。DNA芯片分析結果顯示Glis1對細胞內多種促重編程信號通路包括Myc, Nanog, Lin28, Wnt, Essrb以及間質上皮轉化起推動作用。
1、ELISA試劑盒樣品數量不一，加樣時間長短不一
解決方法： 重復某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近
2、加入后未混勻
加樣后在混勻器上充分混勻
3、酶標儀濾光片不對或輸入波長不對
解決方法：TMB顯色用450/630波長
4、酶標儀測定重復性差
解決方法：校對酶標儀
5、洗滌不正確
解決方法：洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時反應板面向下，垂直用力甩凈內容物（可多甩幾次），在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機洗板時不應有堵孔，洗滌應充分
6、溫育條件不一致（一次用水育，一次用恒溫箱）
解決方法：恒溫箱溫育較水浴顯色深， OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應控制在37℃
7、不慎多加或少加酶或顯色劑
解決方法：多加時顯色深，少加則淺，用記號筆圈上，便于分析
8、閾值附近時陰時陽