化工儀器網
技術文章
人Apelin-36ELISA檢測試劑盒
閱讀：155 發布時間：2014-7-17Apelin-36試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知Apelin-36濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將Apelin-36和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中Apelin-36的濃度呈比例關系。
此外，siRNA分子與DNA甲基化密切相關，尤其siRNA指導著對跳躍基因的甲基化過程。感到驚訝的是，當植物被致病菌感染激活了特定轉座子時，這些siRNA的水平也發生了改變。從而改變對基因的調控。羊ELISA試劑盒發現植物遭遇致病菌后，其表觀遺傳學密碼會發生廣泛的大量改變，DNA中的表觀遺傳學密碼是協助調控基因表達一種指令信息。顯示這些表觀遺傳學改變與負責調控植物脅迫應答的基因活性有關，這說明表觀基因組能幫助植物對致病菌和其他環境脅迫產生抗性。
操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
有一些基因的表達與脅迫應答中甲基化改變有關，植物的脅迫應答引發了大量的甲基化修飾改變，從而幫助植物抵御入侵的致病菌。羊ELISA試劑盒為了限制感染的致病菌生長，植物采用了一系列復雜的防御機制，激活多種激素信號來改變基因表達的網絡。顯示植物的這些細胞防御應答通過DNA甲基化機制控制基因表達的網絡。這些遺傳物質的表觀遺傳學改變，包括DNA甲基化模式的改變和組蛋白的修飾（組蛋白在基因調節中具有關鍵作用），可以不改變DNA序列而對基因表達進行調控。