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技術(shù)文章

ELISA常用方法優(yōu)勢劣勢對比

閱讀:558          發(fā)布時(shí)間:2016-7-11

一、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。ELISA試劑盒

優(yōu)勢:操作手續(xù)簡短,因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。

劣勢:試驗(yàn)中的一抗都得用酶標(biāo)記,但不是每種抗體都適合做標(biāo)記,費(fèi)用相對提高。

二、間接法:此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標(biāo)記,改用酶標(biāo)記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。

優(yōu)勢:二抗可以加強(qiáng)信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標(biāo)記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應(yīng)性。

劣勢:交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高。

三、雙抗體夾心法:被檢測的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測抗體,此抗體可用酶標(biāo)記后直接測定抗原的量;或不標(biāo)記,再透過酶標(biāo)記的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取,才可避免交互反應(yīng)或競爭相同的抗原結(jié)合部位。

優(yōu)勢:高靈敏、高專一性,抗原無須事先純化。

劣勢:抗原一定得擁有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。

IGF2R    胰島素樣生長因子2受體抗體
IKZF3    鋅指蛋白Aiolos抗體
SOX13    胰島細(xì)胞抗原抗體12/核轉(zhuǎn)錄因子SOX13抗體
INSC    有絲分裂相關(guān)蛋白INSC抗體
phospho-IKKi    磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體
RanBP7    RAN結(jié)合蛋白7抗體
IGSF9B    免疫球蛋白超家族成員B抗體
IHPK3    六磷酸肌醇激酶3抗體
IFNK    干擾素kappa蛋白抗體
IL-1 Alpha    白介素1α/IL-1α抗體
IL-1 Alpha    白介素1α/IL-1α抗體
phospho-IL2 Receptor beta     磷酸化白介素2受體β鏈抗體
INSL3    胰島素樣蛋白3抗體
IRE1a    內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體

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