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腱調(diào)蛋白(TNMD)ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用  標(biāo)本：體液

腱調(diào)蛋白(TNMD)ELISA試劑盒試驗(yàn)原理：
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA 檢測(cè)試劑盒洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。

腱調(diào)蛋白(TNMD)ELISA試劑盒自備材料
1．蒸餾水。
2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2．實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

腱調(diào)蛋白(TNMD)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)
1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
2．實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6．洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7．底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8．加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9．按照中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

腱調(diào)蛋白(TNMD)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。

2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

腱調(diào)蛋白(TNMD)ELISA試劑盒操作步驟
1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2．根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9．在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

腱調(diào)蛋白(TNMD)ELISA試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

腱調(diào)蛋白(TNMD)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析
1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

3、檢測(cè)值范圍：0-800pg/ml

4、敏感度： 1.0 pg/ml

   NADPH  小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸  規(guī)格： 48T/96T

 PF-4/CXCL4  小鼠血小板因子4  規(guī)格： 48T/96T

 PF-3  小鼠血小板因子3  規(guī)格： 48T/96T

 PDGFsR-α  小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α  規(guī)格： 48T/96T

 PDGF-BB  小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB  規(guī)格： 48T/96T

 PDGF-AB  小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB  規(guī)格： 48T/96T

 PDGF  小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子  規(guī)格： 48T/96T

 TPO  小鼠血小板生成素  規(guī)格： 48T/96T

 GP-ⅡbⅢa  小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa  規(guī)格： 48T/96T

 PAF  小鼠血小板活化因子  規(guī)格： 48T/96T

 TSP-1  小鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1  規(guī)格： 48T/96T

 FDP  小鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物  規(guī)格： 48T/96T

 Fbg  小鼠血纖蛋白原  規(guī)格： 48T/96T

 TXB2  小鼠血栓素B2  規(guī)格： 48T/96T

 TpP  小鼠血栓前體蛋白  規(guī)格： 48T/96T

 TM  小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白  規(guī)格： 48T/96T

 CH50  小鼠血清總補(bǔ)體  規(guī)格： 48T/96T

 NO  小鼠血清一氧化氮  規(guī)格： 48T/96T

 SAA  小鼠血清淀粉樣蛋白A  規(guī)格： 48T/96T

 GMP-140  小鼠血漿α顆粒膜蛋白  規(guī)格： 48T/96T

 HO-2  小鼠血紅素氧合酶2  規(guī)格： 48T/96T

 HO-1  小鼠血紅素氧合酶1  規(guī)格： 48T/96T

 vWF  小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子  規(guī)格： 48T/96T

 BK  小鼠血管舒緩激肽  規(guī)格： 48T/96T

 ANG-R-Tie2  小鼠血管生成素受體Tie2  規(guī)格： 48T/96T

 ANG-R-Tie1  小鼠血管生成素受體Tie1  規(guī)格： 48T/96T

 ANG-4  小鼠血管生成素4  規(guī)格： 48T/96T

 ANG-2  小鼠血管生成素2  規(guī)格： 48T/96T

 ANG-1  小鼠血管生成素1  規(guī)格： 48T/96T

 ANG  小鼠血管生長(zhǎng)素  規(guī)格： 48T/96T

 VCAM-1/CD106  小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1  規(guī)格： 48T/96T

 VEGFR-3  小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3  規(guī)格： 48T/96T

 VEGFR-2  小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2  規(guī)格： 48T/96T

 VEGFR-1  小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1  規(guī)格： 48T/96T

 VEGF-D  小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D  規(guī)格： 48T/96T

 VEGF-C  小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C  規(guī)格： 48T/96T

 VEGF-B  小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B  規(guī)格： 48T/96T

 VEGF  小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子  規(guī)格： 48T/96T

 ACE  小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶  規(guī)格： 48T/96T

 aGT  小鼠血管緊張素原  規(guī)格： 48T/96T

 ANG-Ⅱ  小鼠血管緊張素Ⅱ  規(guī)格： 48T/96T

 Ang-Ⅰ  小鼠血管緊張素Ⅰ  規(guī)格： 48T/96T

 VIP  小鼠血管活性腸肽  規(guī)格： 48T/96T

 BrdU  小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶  規(guī)格： 48T/96T