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博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書
閱讀:163 發(fā)布時間:2015-3-31提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 131.1KB |
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博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用 標本:體液
博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書試驗原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。
博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書自備材料
1.蒸餾水。
2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書操作注意事項
1.試劑應按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準備
標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。
2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。
博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書結果判斷與分析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
INS 兔子胰島素 規(guī)格: 48T/96T
OxLDL 兔子氧化低密度脂蛋白 規(guī)格: 48T/96T
PF-4/CXCL4 兔子血小板因子4 規(guī)格: 48T/96T
PDGF 兔子血小板衍生生長因子 規(guī)格: 48T/96T
PAF 兔子血小板活化因子 規(guī)格: 48T/96T
FDP 兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物 規(guī)格: 48T/96T
TM 兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
PAI-1 兔子纖溶酶原激活物抑制因子1 規(guī)格: 48T/96T
PAI 兔子纖溶酶原激活物抑制因子 規(guī)格: 48T/96T
ICAM-3/CD50 兔子細胞間粘附分子3 規(guī)格: 48T/96T
ICAM-2/CD102 兔子細胞間粘附分子2 規(guī)格: 48T/96T
ICAM-1/CD54 兔子細胞間粘附分子1 規(guī)格: 48T/96T
DPD 兔子脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉 規(guī)格: 48T/96T
DHEA-S 兔子脫氫表雄酮硫酸酯 規(guī)格: 48T/96T
HA 兔子透明質(zhì)酸 規(guī)格: 48T/96T
MBP 兔子髓磷脂堿性蛋白 規(guī)格: 48T/96T
RBP-4 兔子視黃醇結合蛋白4 規(guī)格: 48T/96T
GHRP 兔子生長激素釋放多肽 規(guī)格: 48T/96T
ADM 兔子腎上腺髓質(zhì)素 規(guī)格: 48T/96T
NT-4 兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子4 規(guī)格: 48T/96T
NT-3 兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3 規(guī)格: 48T/96T
NSE 兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶 規(guī)格: 48T/96T
NGF 兔子神經(jīng)生長因子 規(guī)格: 48T/96T
GFAP 兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白 規(guī)格: 48T/96T
PGE2 兔子前列腺素E2 規(guī)格: 48T/96T
PGE1 兔子前列腺素E1 規(guī)格: 48T/96T
GIP 兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽 規(guī)格: 48T/96T
CORT 兔子皮質(zhì)酮/腎上腺酮 規(guī)格: 48T/96T
Cortisol 兔子皮質(zhì)醇 規(guī)格: 48T/96T
FⅡ 兔子凝血因子Ⅱ 規(guī)格: 48T/96T
TR 兔子凝血酶受體 規(guī)格: 48T/96T
BNP 兔子腦鈉素/腦鈉尿肽 規(guī)格: 48T/96T
ES 兔子內(nèi)皮抑素 規(guī)格: 48T/96T
eNOS-3 兔子內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 規(guī)格: 48T/96T
ET-1 兔子內(nèi)皮素1 規(guī)格: 48T/96T
ET-1 兔子內(nèi)皮素1 規(guī)格: 48T/96T
IgM 兔子免疫球蛋白M 規(guī)格: 48T/96T
IgG 兔子免疫球蛋白G 規(guī)格: 48T/96T
IgE 兔子免疫球蛋白E 規(guī)格: 48T/96T
IgA 兔子免疫球蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
Sam 兔子可溶性粘附分子 規(guī)格: 48T/96T
sVCAM-1 兔子可溶性血管細胞粘附分子1 規(guī)格: 48T/96T
sEPCR 兔子可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體 規(guī)格: 48T/96T
sICAM-1 兔子可溶性細胞間粘附分子1 規(guī)格: 48T/96T
sCD40L 兔子可溶性白細胞分化抗原40配體 規(guī)格: 48T/96T
sP-selectin 兔子可溶性P選擇素 規(guī)格: 48T/96T
sE-selectin 兔子可溶性E選擇素 規(guī)格: 48T/96T
ANGA 兔子抗中性粒細胞顆粒抗體 規(guī)格: 48T/96T
MIP-5 兔子巨噬細胞炎性蛋白5 規(guī)格: 48T/96T
MIP-1α/CCL3 兔子巨噬細胞炎性蛋白1α 規(guī)格: 48T/96T
Collagenase II 兔子膠原酶II 規(guī)格: 48T/96T
Collagenase I 兔子膠原酶I 規(guī)格: 48T/96T
bFGF 兔子堿性成纖維細胞生長因子 規(guī)格: 48T/96T
T4 兔子甲狀腺素 規(guī)格: 48T/96T
TIMP-1 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1 規(guī)格: 48T/96T
MMP-9 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9 規(guī)格: 48T/96T
MMP-5 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5 規(guī)格: 48T/96T
MMP-4 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4 規(guī)格: 48T/96T
MMP-3 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3 規(guī)格: 48T/96T
Cr 兔子骨膠原交聯(lián) 規(guī)格: 48T/96T
T 兔子睪酮 規(guī)格: 48T/96T
HGF 兔子肝細胞生長因子 規(guī)格: 48T/96T
TE 兔子端粒酶 規(guī)格: 48T/96T
CETP 兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白 規(guī)格: 48T/96T
MCP-1/CCL2/MCAF 兔子單核細胞趨化蛋白1 規(guī)格: 48T/96T
PRL 兔子催乳素 規(guī)格: 48T/96T
PRL 兔子催乳素 規(guī)格: 48T/96T
ACTH 兔子促腎上腺皮質(zhì)激素 規(guī)格: 48T/96T
FSH 兔子促卵泡素 規(guī)格: 48T/96T
TSH 兔子促甲狀腺素 規(guī)格: 48T/96T
LH 兔子促黃體激素 規(guī)格: 48T/96T
LH 兔子促黃體激素 規(guī)格: 48T/96T
E2 兔子雌二醇 規(guī)格: 48T/96T
iFABP 兔子腸脂肪酸結合蛋白 規(guī)格: 48T/96T
C3a 兔子補體片斷3a 規(guī)格: 48T/96T
C4 兔子補體蛋白4 規(guī)格: 48T/96T
EGF 兔子表皮生長因子 規(guī)格: 48T/96T
LIFR 兔子白血病抑制因子受體 規(guī)格: 48T/96T
LTB4 兔子白三烯B4 規(guī)格: 48T/96T
IL-4 兔子白介素4 規(guī)格: 48T/96T
IL-3 兔子白介素3 規(guī)格: 48T/96T
IL-2 兔子白介素2 規(guī)格: 48T/96T
IL-1sR Ⅰ 兔子白介素1可溶性受體I 規(guī)格: 48T/96T
IL-1β 兔子白介素1β 規(guī)格: 48T/96T
IL-10 兔子白介素10 規(guī)格: 48T/96T
IL-1 兔子白介素1 規(guī)格: 48T/96T
IFN-γ 兔子γ干擾素 規(guī)格: 48T/96T
β-TG 兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
IFN-α 兔子α干擾素 規(guī)格: 48T/96T
S-100 兔子S100蛋白 規(guī)格: 48T/96T
S-100B 兔子S100B蛋白 規(guī)格: 48T/96T
E-Selectin/CD62E 兔子E選擇素 規(guī)格: 48T/96T