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肉毒素A說明書定性
閱讀：314 發布時間：2015-8-7| 提 供 商 | 上海撫生實業有限公司 | 資料大小 | 21.4KB |
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肉 毒 素 肉 毒 素 肉 毒 素 肉 毒 素 A 酶 聯 免 疫 酶 聯 免 疫 酶 聯 免 疫 酶 聯 免 疫 分 析 分 析 分 析 分 析
試 劑 試 劑 試 劑 試 劑 盒 使 用 說 明 書 盒 使 用 說 明 書 盒 使 用 說 明 書 盒 使 用 說 明 書
本 試 劑 盒 僅 供 研 究 使 用 。
9 6 T
使 用 目 的 使 用 目 的 使 用 目 的 使 用 目 的 ： ： ： ：
本 試 劑 盒 用 于 測 定 血 清 、 血 漿 及 相 關 液 體 樣 本 中 肉 毒 素 A 表 達 。
實 驗 原 理 實 驗 原 理 實 驗 原 理 實 驗 原 理
本 試 劑 盒 應 用 雙 抗 體 夾 心 法 測 定 標 本 中 肉 毒 素 A 表 達 。 用 純 化 的 肉 毒 素 A 抗 體 包 被 微 孔 板 ，
制 成 固 相 抗 體 ， 可 與 樣 品 中 肉 毒 素 A 相 結 合 ， 經 洗 滌 除 去 未 結 合 的 抗 原 和 其 他 成 分 后 再 與
H R P 標 記 的 肉 毒 素 A 抗 體 結 合 ， 形 成 抗 體 - 抗 原 - 酶 標 抗 體 復 合 物 ， 經 過 徹 底 洗 滌 后 加 底 物
T M B 顯 色 。 T M B 在 H R P 酶 的 催 化 下 轉 化 成 藍 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 轉 化 成 zui 終 的 黃 色 。 用
酶 標 儀 在 4 5 0 n m 波 長 下 測 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 與 C U T O F F 值 相 比 較 ， 從 而 判 定 標 本 中 肉 毒
素 A 的 存 在 與 否 。
試 劑 盒 組 成 試 劑 盒 組 成 試 劑 盒 組 成 試 劑 盒 組 成
1 3 0 倍 濃 縮 洗 滌 液 2 0 m l × 1 瓶 7 終 止 液 6 m l × 1 瓶
2 酶 標 試 劑 6 m l × 1 瓶 8 陽 性 對 照 0 . 5 m l × 1 瓶
3 酶 標 包 被 板 1 2 孔 × 8 條 9 陰 性 對 照 0 . 5 m l × 1 瓶
4 樣 品 稀 釋 液 6 m l × 1 瓶 1 0 說 明 書 1 份
5 顯 色 劑 A 液 6 m l × 1 瓶 1 1 封 板 膜 2 張
6 顯 色 劑 B 液 6 m l × 1 / 瓶 1 2 密 封 袋 1 個
標 本 標 本 標 本 標 本 要 求 要 求 要 求 要 求
1 ． 標 本 采 集 后 盡 早 進 行 提 取 ， 提 取 按 相 關 文 獻 進 行 ， 提 取 后 應 盡 快 進 行 實 驗 。 若 不 能
馬 上 進 行 試 驗 ， 可 將 標 本 放 于 - 2 0 ℃ 保 存 ， 但 應 避 免 反 復 凍 融
2 ． 不 能 檢 測 含 N a N 3 的 樣 品 ， 因 N a N 3 抑 制 辣 根 過 氧 化 物 酶 的 （ H R P ） 活 性 。
操 作 步 驟 操 作 步 驟 操 作 步 驟 操 作 步 驟
1 . 編 號 ： 將 樣 品 對 應 微 孔 按 序 編 號 ， 每 板 應 設 陰 性 對 照 2 孔 、 陽 性 對 照 2 孔 、 空 白 對 照 1
孔 （ 空 白 對 照 孔 不 加 樣 品 及 酶 標 試 劑 ， 其 余 各 步 操 作 相 同 ）
2 . 加 樣 ： 分 別 在 陰 、 陽 性 對 照 孔 中 加 入 陰 性 對 照 、 陽 性 對 照 5 0 μ l 。 然 后 在 待 測 樣 品 孔 先
加 樣 品 稀 釋 液 4 0 μ l ， 然 后 再 加 待 測 樣 品 1 0 μ l 。 加 樣 將 樣 品 加 于 酶 標 板 孔 底 部 ， 盡 量 不
觸 及 孔 壁 ， 輕 輕 晃 動 混 勻 ，
3 . 溫 育 ： 用 封 板 膜 封 板 后 置 3 7 ℃ 溫 育 3 0 分 鐘 。
4 . 配 液 ： 將 3 0 倍 濃 縮 洗 滌 液 用 蒸 餾 水 3 0 倍 稀 釋 后 備 用
5 . 洗 滌 ： 小 心 揭 掉 封 板 膜 ， 棄 去 液 體 ， 甩 干 ， 每 孔 加 滿 洗 滌 液 ， 靜 置 3 0 秒 后 棄 去 ， 如 此
重 復 5 次 ， 拍 干 。