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人沙眼衣原體抗體,CTELISA試劑盒
閱讀：133 發布時間：2012-12-17人沙眼衣原體抗體,CISA試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測，7個工作日出結果，提供原始數據！
檢測范圍：每種的檢測范圍都有所不同,具體請查看說明書
特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的指標，且與其他相關蛋白無交叉反應。
有效期：6個月
預期應用：ELISA法檢測指標血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中含量或靈敏度。
實驗原理
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗指標抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）。
2．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3．中、英文說明書可能會有不一致之處，請以英文說明書為準。
4．剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響。
需要而未提供的試劑和器材
1. 標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器
6. 蒸餾水，容量瓶等
1. 酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 標準品（Standard）：2瓶。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. 生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
人沙眼衣原體抗體,CISA試劑盒本品用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗HVA抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗HVA抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HVA呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
1. 酶標儀（建議參考儀器使用說明提前預熱）
2. 微量加液器及吸頭，EP管
3. 蒸餾水或去離子水，全新濾紙
1. 酶聯板：一塊（96孔）
2. 標準品，2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為100 ug/ml，做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋）后，分別稀釋成100 ug/ml，50 ug/ml，25 ug/ml，12.5 ug/ml，6.25 ug/ml，3.12 ug/ml，1.56 ug/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ug/ml，臨用前15分鐘內配制。如配制 50 ug/ml標準品：取0.5ml （不要少于0.5ml ） 100 ug/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液：1×20ml。
4. 檢測稀釋液A：1×10ml。
5. 檢測稀釋液B：1×10ml。
6. 檢測溶液A：1×120μl（1:100）臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（100μl/孔），實際配制時應多配制 0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。
7. 檢測溶液B：1×120μl/瓶（1:100）臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
11. 覆膜：5張
人沙眼衣原體抗體,CISA試劑盒公司其他產品：human schistosoma 人血吸蟲（schistosoma）
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Human Legionella antibody IgM,LP Ab-IgM 人軍團菌抗體IgM（LP Ab-IgM ）
Human Legionella antibody IgG,LP Ab-IgG 人軍團菌抗體IgG（LP Ab-IgG）
人沙眼衣原體抗體,CISA試劑盒實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試 劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。
加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液 100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加 檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜，37℃反應60分鐘。
溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后立即進行檢測。