詳細介紹
具體步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 大鼠角膜上皮細胞 |
組織來源 | 眼角膜組織 |
商品貨號 | A01X1724 |
種屬來源 | 大鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
細胞簡介 | 大鼠角膜上皮細胞分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜 的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以 保護眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣 。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細 胞層。其主要功能如下:①角膜是無血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白 的功能,分三層細胞層,外層即是上皮細胞;②角膜上皮細胞能參與先天性免疫,能感應(yīng) 病原體存在并發(fā)出信號從而激活角膜防御系統(tǒng);③角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶。角 膜上皮細胞的體外培養(yǎng)對研究角膜的生理學、病理學、免疫學以及分子生物學都是極為重 要的手段,常用于研究細胞代謝產(chǎn)物、病毒感染、各種生長因子和藥物對細胞生長的影響 。 |
包被條件 | 鼠尾膠原I(2-5μg/cm2) |
培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
傳代特性 | 可傳1-2代 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
注意事項:
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通。
原代細胞培養(yǎng):
原代細胞(Primary cells):是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養(yǎng)的細胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。
原代細胞培養(yǎng):由于原代細胞生長緩慢,繁殖一定的代數(shù)停止生長(一般10代以內(nèi))。所以一般認為:培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。
公司產(chǎn)品僅供科研研究實驗
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔頸靜脈內(nèi)皮細胞 | 友好戈登氏菌Gordonia amicalis |
小鼠腦星形膠質(zhì)細胞 | 玫瑰小雙孢菌玫瑰亞種Microbispora rosea subsp. rosea |
小鼠胃粘膜上皮細胞 | 彎曲高溫單孢菌Thermomonospora curvata |
大鼠卵巢表面上皮細胞 | 脫葉鏈霉菌Streptomyces exfoliates |
兔卵巢內(nèi)膜細胞 | 維及尼鏈霉菌Streptomyces virginiae |
大鼠原代B淋巴細胞 | 相模原小單孢菌Micromonospora sagamiensis |
豬乳腺上皮細胞 | 淺褐小單孢菌Micromonospora brunnescens |
人宮頸癌細胞 | 青銅小單孢菌Micromonospora chalcea |
兔腎周細胞 | 絳紅小單孢菌Micromonospora purpurea |
兔腹腔主動脈平滑肌細胞 | 桔橙小單孢菌Micromonospora aurantiaca |
小鼠卵巢間質(zhì)細胞 | 分枝桿菌Mycobacterium sp. |
兔主動脈弓內(nèi)皮細胞 | 葡萄牙鏈霉菌Streptomyces lusitanus |
人甲狀腺成纖維細胞 | 大鼠角膜上皮細胞玫瑰小雙孢菌Microbispora rosea |
大鼠原代胸腺基質(zhì)細胞 | 普通高溫放線菌Thermoactinomyces vulgaris |
兔肺動脈內(nèi)皮細胞 | 炭樣小單孢菌Micromonospora carbonacea |