詳細介紹
原代細胞培養(yǎng):
原代細胞(Primary cells):是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養(yǎng)的細胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。
原代細胞培養(yǎng):由于原代細胞生長緩慢,繁殖一定的代數(shù)停止生長(一般10代以內(nèi))。所以一般認為:培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。
公司產(chǎn)品僅供科研研究實驗
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 豬膀胱上皮細胞 |
組織來源 | 膀胱組織 |
商品貨號 | A01X2263 |
種屬來源 | 豬 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
細胞簡介 | 膀胱壁由三層組織組成,由內(nèi)外為粘膜層、肌層和外膜。其中,粘膜層為極薄的一層移行上皮組織,和輸尿管及尿道黏膜彼此連貫。體外培養(yǎng)膀胱上皮細胞不僅為組織工程膀胱,尿道提供種植細胞的必要手段,也是研究移行上皮細胞腫瘤發(fā)生和治療的基礎(chǔ)與前提。 |
包被條件 | |
培養(yǎng)基 | 原代角質(zhì)形成細胞培養(yǎng)體系 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 鋪路石狀細胞 |
傳代特性 | 根據(jù)細胞特性 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
具體步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
注意事項:
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通。
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