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小鼠脊髓星形膠質細胞

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    上海市

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5×10^57750元15 瓶 可售
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更新時間:2024-01-30 09:10:44瀏覽次數:384

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
貨號 A01X1962 主要用途 僅供科研研究實驗
組織來源 脊髓組織 種屬來源 小鼠
生長特性 貼壁 細胞形態 梭形、多角形
小鼠脊髓星形膠質細胞的相關產品:人皮膚基底細胞癌TE354.T(STR鑒定正確)Sporosarcina pasteurii巴氏生孢八疊球菌小鼠肺癌細胞帶熒光 LLC+LUCAlcanivorax dieselolei柴油食烷菌人惡性黑色瘤細胞A375 (STR鑒定正確)Acetobacter tropicalis熱帶醋桿菌人腦膠質瘤細胞Hs 683(STR鑒定正確Lactobacillus al

詳細介紹

一、細胞基本屬性:

細胞名稱

小鼠脊髓星形膠質細胞

商品貨號

A01X1962

組織來源

脊髓組織

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

種屬來源

小鼠

傳代特性

可傳3代左右

生長特性

貼壁

細胞形態

梭形、多角形

 

包被條件: 

培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

傳代比例:

消化液:0.25%胰蛋bai酶

培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

細胞簡介

小鼠脊髓星形膠質細胞分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經結構,位于脊柱的椎管內且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發出成對的神經,分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形(蝴蝶型)灰質區,主要由神經細胞構成;在灰質區周圍為白質區,主要由有髓神經纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經(稱為脊神經)分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節,31對脊神經就是由不同的脊椎發出的。神經系統基本的結構和功能單位是神經元,即神經細胞,其大小和外觀在中樞神經系統中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體,內含神經絲、微管、內質網、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經元突起的粗面內質網可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍色斑塊狀,稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經元的突起,能在神經元之間傳遞電沖動,突起的大小和形態各不相同,很難用常規的顯微鏡鑒別。。

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原代細胞實驗步驟:

一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。

二、在超凈工作臺中,將大鼠斷頭置于玻璃培養皿中,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養皿中,去除小腦和間腦。

三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養皿中。

四、用細解剖鑷去除大腦白質、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質。

五、大腦皮質放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。

七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。

八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。

九、沉淀加入2ml DMEM培養液懸浮混勻,鋪于經離心形成連續梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。

十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM

漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。

加入DMEM培養液(20%FBS,4ug/ml嘌呤霉素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養皿中,置于37℃、5%CO2培養箱內靜置培養24h后更換不含嘌呤霉素的混合培養基,隨后隔天換液。

QQ截圖20240123162116.png

原代細胞使用方法:

是一種貼壁細胞,細胞形態呈梭形、多角形,在技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養基終止消化;

3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;

4)待細胞貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化;

3)經1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養基重懸沉淀,接種于新的培養瓶內;

4)待細胞貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產品:
雜交瘤細胞株;EV7_VP1_11G12_IgA

雜交瘤細胞株;SZ-169(1G11)
雜交瘤細胞株;AOZ-4G3
中國倉鼠卵巢癌細胞;CHO-9618s
中國倉鼠卵巢癌細胞;CHO-NIDVD
雜交瘤細胞株;AHD-6A7
雜交瘤細胞株;09199
雜交瘤細胞株;CyHv-2-ORF72-D8
雜交瘤細胞株;PEDV-J11E
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK21-XF-C13
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK21-XF-C02
猴胎腎細胞;Marc-145XF
人胃印戒細胞癌細胞株;GC-006-03
犬腎細胞;MDCK-C65
犬腎細胞;MDCK-C09
萄糖銨培養基
萄糖半固體培養基
動力-吲哚-尿培養基基礎(MIU)
亞硒鹽增菌液(SF)
醋鉛培養基
SIM培養基
乳糖肉湯
胰蛋白胨大豆肉湯
Baird-Parker瓊脂基礎
亞碲鹽卵黃增菌液
小鼠脊髓星形膠質細胞兔血漿
DNA瓊脂
7.5%氯化鈉肉湯
腸毒產毒培養基
亞碲鹽肉湯培養基基礎

 


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