化工儀器網
詳細介紹
一、細胞基本屬性：
細胞名稱 | 兔股動脈內皮細胞 | 商品貨號 | A01X2032 |
組織來源 | 股動脈 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
種屬來源 | 兔 | 傳代特性 | 根據細胞特性 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 鋪路石狀細胞 |
包被條件：
培養基：原代內皮細胞培養體系
換液頻率：每2-3天換液一次
傳代比例：
消化液：0.25%胰蛋bai酶
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介 |
股動脈是下肢動脈的主干，由髂外動脈延續而來。在腹股溝韌帶中點的深面入股三角。在股三角內，股動脈先位于股靜脈的外側，逐漸從外側跨到股靜脈的前方，下行入收肌管，再穿收肌腱裂孔至腘窩，易名腘動脈。 股動脈在腹股溝中點處位置表淺，可摸到搏動，是臨床上急救壓迫止血和進行穿刺的部位。股動脈動脈內皮細胞組成了動脈內壁，并持續受到血流剪切應力的影響。內皮細胞在切應力的作用下，分泌不同的內皮因子并進而影響血管收縮和生長。 主動脈內皮細胞也調節細胞黏附分子的表達來控制和精確調節炎癥反應和組織纖維化。體外培養的原代股動脈內皮細胞可有效地幫助研究者研究內皮功能失調的機理，動脈粥樣化等疾病的發病機理以及發展新的治療方法。 |
圖
原代細胞實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養皿中。
四、用細解剖鑷去除大腦白質、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質。
五、大腦皮質放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養液懸浮混勻，鋪于經離心形成連續梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM
漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養液(20％FBS，4ug/ml嘌呤霉素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養皿中，置于37℃、5％CO2培養箱內靜置培養24h后更換不含嘌呤霉素的混合培養基，隨后隔天換液。
原代細胞使用方法：
是一種貼壁細胞，細胞形態呈鋪路石狀細胞，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；
4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化；
3)經1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內；
4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產品：
615小鼠滑膜肉瘤瘤株；ZM755
615小鼠乳腺癌瘤株；Ca763
615小鼠肺癌瘤株；HP615
615小鼠乳腺癌瘤株；Ca761
615小鼠T細胞性白血病瘤株；L7912
615小鼠乳頭狀肺腺癌瘤株；P615
小鼠肝癌瘤株；H22
615小鼠前胃癌瘤株；Fc
KM小鼠子宮頸癌瘤株；U14
KM小鼠子宮頸癌瘤株；U27
C57小鼠黑色素瘤瘤株；ME（Me）
Walker氏癌肉瘤256瘤株；W256
KM小鼠腦神經膠質母細胞瘤瘤株；G422
KM小鼠網織細胞肉瘤瘤株；LⅡ
T739小鼠肺腺癌瘤株；LA795
印度尼西亞醋酸桿菌Acetobacter indonesiensis
英諾克李斯特氏菌Listeria innocua
英諾克李斯特氏菌（無害李斯特氏菌）Listeria innocua
嬰兒鏈球菌Streptococcus infantis
鷹嘴豆中間根瘤菌Mesorhizobium ciceri
熒光假單胞菌Pseudomonas fluorescens Migula
熒光假單胞菌基因組DNAGenomic DNA from Pseudomonas fluorescens Migula
熒光假單胞菌生物型FPseudomonas fluorescens biotype F
癭草黃青霉Penicillium minioluteum
應變型念珠菌Candida auris Satoh & Makimura
兔股動脈內皮細胞擁擠棒桿菌Corynebacterium accolens
蛹蟲草Cordyceps millitaris
蛹蟲草（北冬蟲夏草、北蟲草）Cordyceps millitaris (L. ex Fr.) Link
尤卡表球菌Epicoccum yuccae
油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary
化工儀器網