詳細介紹
具體步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 人主動脈平滑肌細胞 |
組織來源 | 主動脈組織 |
商品貨號 | A01X1275 |
種屬來源 | 人 |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
細胞簡介 | 人主動脈平滑肌細胞分離自主動脈組織;主動脈是體循環的動脈主干。其運行路徑為:升主動脈起于左心室,至右側第2胸肋關節高度移行為主動脈弓,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈;在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,以上為胸主動脈,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈;髂總動脈在骶髂關節高度分為髂內、外動脈。主動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。主動脈平滑肌細胞在心血管疾病發生、發展中具有重要作用,以主動脈平滑肌細胞為實驗研究對象,探討心血管疾病相關發病機制是目前研究的熱點;體外培養的主動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。 |
包被條件 | |
培養基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
傳代特性 | 可傳5代左右;3代以內狀態最佳 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
注意事項:
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技術部溝通。
原代細胞培養:
原代細胞(Primary cells):是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養的細胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。
原代細胞培養:由于原代細胞生長緩慢,繁殖一定的代數停止生長(一般10代以內)。所以一般認為:培養的原代的第1和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。
公司產品僅供科研研究實驗
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