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膠體金標記小鼠抗His Tag

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  • 上海士鋒生物科技有限公司
  • 2016-07-17 06:07:57
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【簡單介紹】

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【詳細說明】

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英文:Monoclonal Mouse Anti-His Tag*GOLD  

 規格:1ml

庫存:廠家現貨

用途:科研試驗

保存條件:低溫避光

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鄭重承諾:凡是購買公司產品,出現質量問題,無條件退貨退款。

操作步驟
  方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
  1. 包被:用0.05M PH9.6 碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
  3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
  4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
  5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O·D值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
  方法二 用于檢測未知抗體的間接法:
  用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
  加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔 中,置37℃孵育1小時,洗滌。
  同時做空白、陰性及陽性孔對照于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml, 37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
  其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6

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