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基于蒸發光檢測器ELSD技術檢測大豆磷脂中磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺含量
閱讀：1346 發布時間：2019-7-2大豆磷脂（測試物質：磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺）
大豆磷脂
Dadou Linzhi
Soya Lecithin
大豆磷脂系從大豆中提取精制而得的磷脂混合物。以無水物計算，含磷量應不得少于2.7%；含氮量應為1.5%?2.0%；含磷脂酰膽堿應不得少于45.0% ，含磷脂酰乙醇胺應不得過30.0% ，含磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺總量不得少于70%。
【性狀】本品為黃色至棕色的半固體、塊狀體。
本品在乙mi和乙醇中易溶，在丙酮中不溶。
酸值 本品的酸值應不大于30。
碘值 本品的碘值應不小于75 。
過氧化值 本品的過氧化值應不大于3.0 。
【鑒別】（1)取本品約10mg,加乙醇溶液2ml,加5%氯化鎘乙醇溶液1?2滴，即產生白色沉淀。
(2 )取本品0.4g ,加乙醇溶液2ml ,加硝酸鉍鉀溶液（取硝酸鉍8g，加硝酸20ml使溶解；另取碘化鉀27.2g，加水50ml使溶解，合并上述兩種溶液，加水稀釋成100ml)l?2滴，即產生磚紅色沉淀。
【檢査】溶液的顏色 取本品適量，加乙醇制成每1ml中含6mg的溶液。照紫外-可見分光光度法（通則0401) ，在350nra的波長處測定吸光度，不得過0.8。
丙酮不溶物 取本品1.0g,精密稱定，加丙酮約15ml,攪拌使其溶解后，用G4垂熔玻璃坩堝濾過，殘淹用丙酮洗滌，洗至丙酮幾乎無色。殘渣在105℃干燥至恒重，不溶物不得少于90.0%。
己烷不溶物 取本品10.0g，精密稱定，加正己烷1 0 0m l,振搖使樣品溶解，用事先在105°C干燥1 小時并稱重的G4垂熔玻璃坩堝濾過，錐形瓶用25ml正己烷洗滌兩次，洗液過濾后，G 4垂熔玻璃坩堝于1051：干燥1 小時并稱重，不溶物不得過0 .3%。
水分 取本品適量，照水分測定法測定，含水分不得過1 .5%。
重金屬 取本品l.O g，依法檢査，含重金屬不得過百萬分之二十。
砷鹽 取本品l.O g 置100ml標準磨口錐形瓶中，加入5ml硫酸，加熱至樣品炭化，滴加濃過氧化氫溶液，至反應停止后繼續加熱，滴加濃過氧化氫溶液至溶液無色，冷卻后加水10ml，蒸發至濃煙消失，依法檢查，應符合規定（0.0002% )。
鉛 取本品O.lg ,精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸5?10ml，混勻，浸泡過夜，蓋上內蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內，進行消解。消解*后，取消解罐置電熱板上緩緩加熱至棕紅色蒸氣揮盡并近干，用0.2%硝酸轉移至10ml容量瓶中，并用0.2%硝酸稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。同法制備試劑空白溶液；另取鉛單元素標準溶液適量，用0.2%硝酸稀釋制成每1ml含鉛0?1OOng的對照品溶液。取供試品和對照品溶液，以石墨爐為原子化器，照原子吸收分光光度法（通則0406法），在283.3mn的波長處測定，含鉛不得過百萬分之二。
殘留溶劑 取本品0.2g ,精密稱定. 置20m l頂空瓶中，加水2ml，密封，作為供試品溶液。精密稱取乙醇、丙酮、乙mi、石油醚、正己烷適量，加水溶解并稀釋制成每lm l分別含上述溶劑約200μg、200μg , 200μg、50μg 、27μg的溶液，作為溶液。照殘留溶劑測定法（通則0861)試驗。毛細管柱 HP-PLOT/Q，0.53mmX30mX40μm) , 火焰離子檢測器( FID ) ;進樣口溫度為250℃，檢測器溫度260℃; 柱溫采用程序升溫，初溫為160℃維持8 分鐘，以每分鐘5μg的升溫速率升溫至190μg，維持6分鐘；分流比20：1。氮氣流速：2ml/min。 頂空溫度80℃，頂空時間45分鐘，進樣體積為1ml。各色譜峰之間的分離度應符合要求。按外標法以峰面積計算，本品含乙醇、丙酮、乙mi均不得過0.2% ，含石油醚不得過0.05% ,含正己烷不得過0.02% ，總殘留溶劑不得過0.5% 。
微生物限度 取本品，依法檢查,每1g供試品中需氧菌總數不得過100cfu,霉菌和酵母菌總數不得過100cfu,不得檢出大腸埃希菌；每10g供試品中不得檢出沙門菌。
【含量測定】磷含量 對照品溶液的制備精密稱取經105℃干燥至恒重的磷酸二氫鉀對照品0.0439g ,置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置另一50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻（每1ml相當于0.04mg 的磷）。
供試品溶液的制備 取本品約0.15g ,精密稱定，置凱氏燒瓶中，加硫酸20ml與硝酸50ml, 緩緩加熱至溶液呈淡黃色，小心滴加過氧化氫溶液，使溶液褪色，繼續加熱30分鐘，冷卻后，轉移至100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。
測定法 精密量取對照品溶液與供試品溶液各2ml，分別置50ml量瓶中，各依次加人鉬酸銨硫酸試液4ml，亞硫酸鈉試液2ml與新鮮配制的對苯二酚溶液（取對苯二酚0.5 g ,加水適量使溶解，加硫酸1滴，加水稀釋成100ml)2ml，加水稀釋至刻度，搖勻，暗處放置4 0分鐘，照紫外-可見分光光度法,在620mn的波長處分別測定吸光度，計算含磷量。
氮含量 取本品O . l g ,精密稱定，照氮測定法測定，計算。
磷脂酰膽堿、磷脂酰乙酵胺含量 照液相色譜法(測定。
色譜條件與系統適應性試驗 用硅膠為填充劑（色譜柱Alltima Sillica, 250mmX 4. 6mmX 5μm) , 柱溫為40℃; 以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(85:15:0.45:0.05，V/V) 為流動相A, 以正己烷-異丙醇-流動相A(20:48:2, V/V)為流動相B;流速為每分鐘1ml ;按下表進行梯度洗脫；蒸發光散射檢測器檢測(漂移管溫度：65度，氣體流速3l/min，氣體壓力：3.8bar)。
取磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰膽堿對照品各適量，用三氯甲烷-甲醇(2 : 1 )溶解，制成每1ml含上述對照品分別為50μg、100μg、100μg、200μg 、200μg、200μg的混合溶液，取上述溶液20μl注入液相色譜儀，各成分按上述順序依次洗脫，各成分分離度應符合規定，理論板數按磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺峰、磷脂酰肌醇計算應不低于1500。
測定法 分別稱取磷脂酰乙醇胺和磷脂酰膽堿對照品適量，精密稱定，用三氯甲烷-甲醇（2 : 1 )溶解，稀釋制成每1ml含磷脂酰膽堿分別為50μg、100μg 、150μg、200μg、300μg 、400μg，含磷脂酰乙醇胺分別為5μg、1 0μg、1 5μg、2 0μg、3 0μg、40μg的溶液作為對照品溶液。精密量取上述對照品溶液各20μl注入液相色譜儀中，記錄色譜圖，以對照品溶液濃度的對數值與相應的峰面積對數值計算回歸方程，另精密稱取本品約15m g ,置50ml量瓶中，加三氯甲烷-甲醇（2:1)溶解并稀釋至刻度。取供試溶液20μl，注入液相色譜儀中，記錄色譜圖，由回歸方程計算磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺的含量。
【類別】口服用藥用輔料，乳化劑，增溶劑等。
【貯藏】密封、避光，低溫（一18℃以下）保存。