分光光度計的原理及分類
分光光度計的定義
分光光度計是利用物質對光的選擇吸收或發射的現象,通過測量不同波長的光能量變化而對物質進行定性和定量分析的儀器。
•按波段范圍分類
可分為真空紫外光譜儀,紫外-可見-近紅外分光光度計,紅外分光光度計,遠紅外光譜儀等
真空紫外10-200nm 紫外200-400nm
可見400-800nm 近紅外800-2500nm
中紅外2.5um-50um 遠紅外50-1000um
•按光譜測量類型分類
用于測量吸收光譜的紫外可見分光光度計;紅外分光光度計;原子吸收分光光度計
用于測量熒光光譜的熒光分光光度計;原子熒光分光光度計等
用于測量拉曼散射光譜的拉曼分光光度計;激光拉曼光譜儀等
•按光度測量方式分類
可分為單光束式分光光度計和雙光束式分光光度計等
單光束式是只用一束光線工作,結構簡單,維修方便,適用于定波長處的測量和分析
雙光束式是把入射光分為兩束,一束光線通過樣品池,另一束通過參比池,然后進行對比測量。
通過這種結構可以快速得到測量數據以及可以消除和補償因光源、探測器等不穩定因素所引起的誤差,適用于連續監控方面的檢測。
•紫外可見分光光度計原理
紫外可見分光光度計的理論依據是建立在光的吸收定律上的。光的吸收定律又稱朗伯-比爾定律,是由1768年朗伯提出的光的吸收與介質厚度之間的關系和1852年比爾提出的光的吸收與吸收介質濃度之間的關系合并而成的。
它的數學式是A=KCL 其中A:吸光度 K:吸光系數 C:濃度 L:介質厚度
當入射光強度一定時,介質的吸光度與介質中吸光物質和介質濃度的乘積成正比——定量功能的依據由于吸光物質對光的選擇性吸收是其自身的物理性質,經過長期的實驗摸索,我們知道了大多數物質吸收峰的波長點,那再根據在某一波長點有吸收峰,可以反推導出吸光物質的性質——定性功能的依據(半定性)
•紫外可見分光光度計結構
紫外可見分光光度計的結構主要是由光源、單色器、樣品室、光電轉換、前置放大、電源控制、數據處理、以及外設等部分組成。