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上海美軒生物科技有限公司

stathmin蛋白促進人SMMC-7721肝癌細胞增殖侵襲能力

時間:2014-7-9閱讀:3777
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  近日,瀘州醫學院醫學基礎研究中心研究人員發表論文,旨在構建微管解離蛋白stathmin過表達的人SMMC-7721肝癌細胞株,并探討stathmin過表達對肝癌細胞增殖侵襲的影響。研究指出,stathmin的過表達能促進人SMMC-7721肝癌細胞的增殖侵襲能力。該文發表在2014年第10期《重慶醫學》雜志上。
 
  采用脂質體將Flag-pcDNA3.1-stathmin重組質粒和Flag-pcDNA3.1空質粒分別轉染人SMMC-7221肝癌細胞,抗生素加壓篩選,構建穩定表達stathmin的SMMC-7721細胞(實驗組),以穩轉空質粒的細胞為對照組,Western blot對建系細胞進行鑒定。采用CCK-8和軟瓊脂克隆形成實驗檢測細胞增殖;流式細胞術(FCM)檢測細胞凋亡和細胞周期;體外細胞運動侵襲實驗(Transwell)測定細胞的運動、侵襲能力。
 
  實驗組中stathmin的表達0.76±0.12較對照組0.16±0.05明顯增加(P<0.05),成功構建了過表達stathmin的人SMMC-7721肝癌細胞株;CCK-8和軟瓊脂克隆形成實驗顯示,實驗組的細胞增殖較對照組明顯增加(A4500.60±0.05 vs.0.29±0.03,P<0.01);實驗組細胞凋亡降低[(5.80±0.33)%vs.(11.57±1.09)%,P<0.05],細胞周期阻滯在G2/M期;Transwell實驗結果證實,與對照組比較,實驗組細胞運動和侵襲能力均顯著加強[運動實驗透膜細胞數:(54.03±7.21)個vs.(130.45±14.13)個;侵襲實驗透膜細胞數:(17.75±2.52)個vs.(57.76±8.50)個],差異均有統計學意義(P<0.01)。

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