小鼠成纖維細胞3T3
小鼠成纖維細胞3T3 株特性:
生長特性:貼壁生長
形態特征:上皮細胞
微生物及支原體檢測:陰性
安全性:所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,換 10ml新鮮培養液后繼續培養。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,倒放于37℃培養箱1-3分鐘預熱,之后翻轉培養瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量*培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加*培養基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。
注意事項:
1、觀察細胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。
2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基,細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。
3、有些細胞貼壁不牢,如發現貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內。
4、收到細胞后,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們。
此外,我公司提供實驗服務如下:
分子生物學
熒光定量PCR|Real-Time PCR|siRNA設計合成|原位雜交|雙熒光素報告基因|RNA提取|定量PCR|多重PCR|質粒構建|基因克隆
細胞生物學
細胞培養|MTT檢測|CCK-8檢測|細胞凋亡檢測|細胞周期檢測|siRNA轉染|細胞侵襲|細胞遷徙|細胞劃痕
免疫病理學
免疫組化|免疫熒光|Tunel凋亡|western blot|Elisa檢測
動物造模
急慢性結腸炎模型|肝纖維化模型|哮喘模型|糖尿病模型|肥胖模型|裸鼠接種腫瘤|非酒精性脂肪肝