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細胞周期檢測/PI檢測

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更新時間:2017-08-02 13:41:00瀏覽次數:1943次

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細胞周期檢測/PI檢測、
細胞周期(Cell Cycle)是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程,細胞的遺傳物質復制并均等地分配給兩個子細胞。細胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。某些細胞在分裂結束后暫時離開細胞周期,停止細胞分裂,執行一定生物學功能(G0期)。

 

細胞周期檢測

服務原理:
    細胞周期(Cell Cycle)是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程,細胞的遺傳物質復制并均等地分配給兩個子細胞。細胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。某些細胞在分裂結束后暫時離開細胞周期,停止細胞分裂,執行一定生物學功能(G0期)。
    流式細胞儀PI染色法檢測細胞周期的原理:由于細胞周期各時相的DNA 含量不同,通常正常細胞的G1/ G0 期具有二倍體細胞的DNA含量(2N) ,而 G2/ M 期具有四倍體細胞的DNA 含量(4N) ,而S期的DNA 含量介于二倍體和四倍體之間。PI可以與DNA結合,其熒光強度直接反映了細胞內DNA含量。因此,通過流式細胞儀PI染色法對細胞內DNA含量進行檢測時,可以將細胞周期各時相區分為G1/G0 期,S 期和G2/M 期,獲得的流式直方圖對應的各細胞周期可通過特殊軟件計算各時相的細胞百分率。

服務應用:
1、腫瘤細胞周期的檢測
2、目的基因瞬轉/穩轉細胞系的細胞周期研究
3、小分子化合物/多肽等藥物篩選及功能安全性研究
4、中藥/中間體等藥物篩選及功能安全性研究
5、目的基因過表達的基因功能研究
6、目的基因RNAi干擾的基因功能研究
7、microRNA過表達/干擾的調控機制研究

 

服務流程:

1. 收集細胞;

2.3000~5000rpm離心5min,收集沉淀,重懸于200ul的PBS中,再次離心收集沉淀;

3.75%冰凍乙醇(-20度保存)4度固定過夜or-20度固定1h;

  1. 離心收集沉淀,PBS洗一次(視沉淀量可忽略);
  2.  5.沉淀重懸于200~500ul的PBS,加入Rnase A 37度水浴1h;
  3. 6.400目紗布過濾至流式管,加入PI染色,4度避光30min-1h,上機器

 

收費標準/服務周期/提供結果:
詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。

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