線粒體膜電位檢測
服務(wù)介紹:
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)是一種以JC-1 為熒光探針,快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于早期的細胞凋亡檢測。
服務(wù)目的:
通過檢測線粒體膜電位變化鑒定樣品的凋亡情況
服務(wù)原理:
JC-1為陽離子脂質(zhì)熒光染料,有單體和多聚體兩種存在狀態(tài),兩者的發(fā)射光譜不同。正常健康線粒體的膜電位(△y)具有極性,JC-1依賴于△y的極性被迅速攝入線粒體內(nèi),并因濃度增高而在線粒體內(nèi)形成多聚體,多聚體發(fā)射光為紅色熒光;而細胞發(fā)生凋亡時,線粒體跨膜電位被去極化,JC-1從線粒體內(nèi)釋放,紅光強度減弱,以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi),發(fā)綠色熒光。
服務(wù)流程:
1、細胞重懸于0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。;
2、用適當?shù)姆椒ㄕT導細胞凋亡,同時設(shè)立陰性依照組合陽性對照組,收集細胞;
3、用PBS洗滌細胞三次,收集不多于1×106的細胞;
4、加入0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20 分鐘。
5、在孵育期間,按照每1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
6、37℃孵育結(jié)束后,600g 4℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
7、用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌2 次:加入1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細 胞,600g 4℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g4℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
8、再用適量JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用流式細胞儀分析。
服務(wù)說明:
1、檢測細胞株(若實驗室有,可共享)。
2、待測毒性藥物(根據(jù)實驗方案有無)。
3、實驗設(shè)計方案或參考文獻。
4、若另有疑問歡迎向本公司咨詢,我們將竭誠為您服務(wù)。
收費標準/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議。
【本公司合作項目】
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線粒體膜電位檢測(JC-1)/膜電位檢測
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