MCF/Adr-LUC人乳腺癌阿霉素-熒光素酶標(biāo)記操作步驟:
請收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(建議在4X物鏡)觀察整個細(xì)胞生長情況。
(一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二) (二)如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1.棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。
如果沒有特別說明,收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。
注:1、觀察細(xì)胞建議在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,否 則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請?jiān)?/span>10X或20X物鏡下。2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請及時(shí)與我們。
其他細(xì)胞如下: 293-LUC人胚腎細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記 |
293-GFP人胚腎細(xì)胞-綠色標(biāo)記 |
A549-LUC肺腺癌-熒光素酶標(biāo)記 |
Bel-7402-GFP人肝癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記 |
C918-GFP人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞-綠色標(biāo)記 |
CT26.WT-LUC小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記 |
CT26.WT-GFP小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記 |
hct116/L-LUC人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株-熒光素酶標(biāo)記 |
hct116/L-GFP人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株-綠色標(biāo)記 |
HCT-116-LUC低分化結(jié)腸腺癌-熒光素酶標(biāo)記 |
HCT-116-GFP低分化結(jié)腸腺癌-綠色標(biāo)記 |
Hep3B-GFP人肝癌-綠色標(biāo)記 |
LLC-LUC小鼠肺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記 |
LLC-GFP小鼠肺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記 |
SGC-7901-GFP人胃癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記 |
SMMC-7721-GFP人肝癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記 |
SW620-LUC人結(jié)腸癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記 |
SW620-GFP人結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記 |
ARPE19-GFP人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞-綠色標(biāo)記 |
此外,我公司提供實(shí)驗(yàn)服務(wù)如下:
分子生物學(xué)
熒光定量PCR|Real-Time PCR|siRNA設(shè)計(jì)合成|原位雜交|雙熒光素報(bào)告基因|RNA提取|定量PCR|多重PCR|質(zhì)粒構(gòu)建|基因克隆
細(xì)胞生物學(xué)
細(xì)胞培養(yǎng)|MTT檢測|CCK-8檢測|細(xì)胞凋亡檢測|細(xì)胞周期檢測|siRNA轉(zhuǎn)染|細(xì)胞侵襲|細(xì)胞遷徙|細(xì)胞劃痕
免疫病理學(xué)
免疫組化|免疫熒光|Tunel凋亡|western blot|Elisa檢測
動物造模
急慢性結(jié)腸炎模型|肝纖維化模型|哮喘模型|糖尿病模型|肥胖模型|裸鼠接種腫瘤|非酒精性脂肪肝