C2C12-GFP小鼠成肌細(xì)胞-綠色標(biāo)記操作步驟:
請(qǐng)收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(建議在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
具體步驟如下:
1.棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。
此外,我公司提供實(shí)驗(yàn)服務(wù)如下:
分子生物學(xué)
熒光定量PCR|Real-Time PCR|siRNA設(shè)計(jì)合成|原位雜交|雙熒光素報(bào)告基因|RNA提取|定量PCR|多重PCR|質(zhì)粒構(gòu)建|基因克隆
細(xì)胞生物學(xué)
細(xì)胞培養(yǎng)|MTT檢測(cè)|CCK-8檢測(cè)|細(xì)胞凋亡檢測(cè)|細(xì)胞周期檢測(cè)|siRNA轉(zhuǎn)染|細(xì)胞侵襲|細(xì)胞遷徙|細(xì)胞劃痕
免疫病理學(xué)
免疫組化|免疫熒光|Tunel凋亡|western blot|Elisa檢測(cè)
動(dòng)物造模
急慢性結(jié)腸炎模型|肝纖維化模型|哮喘模型|糖尿病模型|肥胖模型|裸鼠接種腫瘤|非酒精性脂肪肝