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染色質(zhì)免疫共沉淀(chip)/Chip assay/chip-seq
  • 染色質(zhì)免疫共沉淀(chip)/Chip assay/chip-seq
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更新時(shí)間:2024-08-12 21:00:06

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染色質(zhì)免疫共沉淀(chip)/Chip assay/chip-seq
染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)主要應(yīng)用于驗(yàn)證及探尋體內(nèi)環(huán)境中,蛋白質(zhì)和DNA的直接相互作用,旨在探索特定蛋白質(zhì)在DNA上的特定結(jié)合序列,常在研究轉(zhuǎn)錄調(diào)控以及組蛋白修飾中被應(yīng)用到。

 

染色質(zhì)免疫共沉淀

服務(wù)簡(jiǎn)介:

染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)主要應(yīng)用于驗(yàn)證及探尋體內(nèi)環(huán)境中,蛋白質(zhì)和DNA的直接相互作用,旨在探索特定蛋白質(zhì)在DNA上的特定結(jié)合序列,常在研究轉(zhuǎn)錄調(diào)控以及組蛋白修飾中被應(yīng)用到。

服務(wù)原理:

在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物,并將其隨機(jī)切斷為一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段,然后通過免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體,特異性地富集目的蛋白結(jié)合的 DNA 片段,通過對(duì)目的片斷的純化與檢測(cè),從而獲得蛋白質(zhì)與 DNA 相互作用的信息。

服務(wù)優(yōu)勢(shì):

完善的實(shí)驗(yàn)平臺(tái):全進(jìn)口的儀器試劑,高標(biāo)準(zhǔn)甲醇交聯(lián)、Bioruptor超聲打斷;
2. 專業(yè)的實(shí)驗(yàn)流程:*的ChIP優(yōu)化流程,個(gè)性化實(shí)驗(yàn)方案,IP效率高,高成功率(高于95%);
3. 豐富的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn):專業(yè)的ChIP服務(wù)部門,實(shí)驗(yàn)人員從事ChIP實(shí)驗(yàn)長(zhǎng)達(dá)5年以上,上千次成功ChIP實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn),針對(duì)不同動(dòng)植物組織有不同的前處理方式。
服務(wù)流程:
1、樣品準(zhǔn)備:培養(yǎng)細(xì)胞(若樣品為組織,可先培養(yǎng)原代細(xì)胞);固定,或者直接活細(xì)胞送樣。
2、細(xì)胞固定:此步驟目的為將結(jié)合在DNA上的蛋白用共價(jià)形式交聯(lián)在所結(jié)合的位點(diǎn)上,避免在之后的操作步驟中脫離丟失。直接將甲醛加入細(xì)胞培養(yǎng)液,搖晃固定10分鐘后,迅速加入2.5M甘氨酸解交聯(lián)5分鐘,PBS洗滌,刮下細(xì)胞。
3、超聲打碎: 此步驟目的為將長(zhǎng)鏈的DNA打碎成200-1000bp的DNA片段。使用設(shè)備是超聲水浴鍋,EP管在冰水混合物中超聲,超聲后細(xì)胞懸液變得澄清透明。離心取上清。
4、免疫沉淀:此步驟是加入特異性抗體和對(duì)照IgG,和結(jié)合抗體的磁珠(或protein A/G)。經(jīng)稀釋后,超聲產(chǎn)物分成兩份,分別加入特異性抗體和對(duì)照IgG,輪轉(zhuǎn)過夜,第二天加入磁珠輪轉(zhuǎn)4小時(shí)。
5、洗滌:此步驟是減少非特異性結(jié)合。分別用稀釋緩沖液、低鹽溶液、高鹽溶液、氯化鋰溶液以及TE緩沖液洗滌共7次。用洗脫緩沖液在65℃洗脫過夜。
6、DNA純化:將洗脫的產(chǎn)物用DNA純化試劑盒純化,得到50ul純化產(chǎn)物,用于檢測(cè)ChIP結(jié)果。

 

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
詳談,我們會(huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。

【本公司合作項(xiàng)目】
慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實(shí)驗(yàn),病理實(shí)驗(yàn),免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞實(shí)驗(yàn),動(dòng)物實(shí)驗(yàn),蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn)等,能夠進(jìn)行藥效學(xué)評(píng)價(jià)、毒理學(xué)評(píng)價(jià)、細(xì)胞藥篩、動(dòng)物建模、病理檢測(cè)、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測(cè)序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析服務(wù)!

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