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脂肪肝動物模型
原理
肝臟是脂質代謝的中心器官。在生理狀態下,肝臟通過攝取從食物中吸收以及由乳糜微?;蛑炯毎尫湃胙?/span>FFA,用于合成TG、TC及磷脂和糖脂,這些合成脂與特異的載脂蛋白結合而被分泌入血漿,當來源于飲食或從脂肪組織中動員的FFA急劇增加,超過了肝臟脂質代謝動力循環平衡,則脂肪在肝細胞內開始大量堆積而形成脂肪肝。本脂肪肝模型即通過長期喂食高脂飼料所致。高脂飼料是指在基礎飼料中加入一定比例的脂肪類食物,如5%-20%豬油、1%-10%膽固醇、5%-15%蛋黃粉等。為了促使病變的形成,在高脂飼料中還可添加膽酸鈉或富含不飽和脂肪酸的物質如玉米油、魚油等,后者尚易誘致脂肪肝伴炎癥和纖維化。本模型動物通常選用大鼠和家兔。模型大鼠在采用高脂飼料持續飼養2-4周時可出現高脂血癥,8-12周后肝臟呈中-重度大泡性脂肪變伴轉氨酶升高應用大鼠建立脂肪肝模型,有飼養方便、抵抗力強、食性與人類相近、模型復制成功率高等優點。
特點
模型大鼠血清TC、TG、FFA、AST、ALT升高,肝組織TC、TG、FFA含量增加,AOX表達增高;肝臟全小葉脂肪變性,屬大囊泡性,并有大囊泡融合形成的脂囊;脂變肝細胞以*靜脈周圍*;*存在小葉內炎癥,以單核細胞、淋巴細胞浸潤為主,并可見點狀、灶狀、碎屑樣壞死。模型家兔肝臟腫脹,表面呈黃白色,油膩,肝組織有變性(顆粒變性或嗜酸性變)和壞死(溶解及點樣壞死)呈局灶分布并伴淋巴細胞浸潤,并可見細胞質內充滿大量大小不等的圓形脂滴;肝小葉排列紊亂、邊界不清,但未形成假小葉;肝索結構紊亂,纖維組織輕度增生,肝竇和*靜脈間有紅細胞堆積。
方法
成年大鼠,每日喂養含2%膽固醇、10%豬油、0.3%膽酸鈉等成分的高脂飼料,連續8周,或成年家兔,每日喂食含1%膽固醇、10%豬油的高脂飼料40g/kg體重和高膽固醇飼料80mg/kg體重,連續12周。造模畢,立即抽取全血及摘取肝組織,測定血中總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、游離脂肪酸(FFA)、極低密度脂蛋白(VLDL)、堿性磷酸酶(ALP)、丙氨酸轉氨酶(ALT)、天冬氨酸轉氨酶(AST)及肝組織中總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、游離脂肪酸(FFA)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的含量,采用反轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)測定肝組織中酞基輔酶A氧化酶(AOX)的表達,并對肝臟作組織形態學檢查。
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