組織脫鈣/硬組織脫鈣/骨組織脫鈣

組織脫鈣

脫鈣：由于骨組織里有鈣鹽，影響常規石蠟切片制作，因此骨組織及鈣化病灶固定后，需先將鈣鹽除去使組織軟化，才能進行常規切片。若脫鈣不充分，則切片易碎裂，并損傷切片及刀刃，脫去鈣鹽的過程即脫鈣。

實驗原理：
      骨組織不同于一般的軟組織，它是一種堅硬的結締組織，有骨基質和骨細胞組成。骨基質是由有機物質和無機物質緊密結合而成，主要成分有由粘多糖和一些膠原纖維樣骨膠纖維構成的骨樣組織和沉著于其中的無機鹽（骨鹽）形成。無機鹽以羥基磷灰石結晶的形式存在，其中絕大部分為水合磷酸鈣，此外還包括微量碳酸鹽和檸檬酸鹽等。因此骨和其它一些已經鈣化的組織在脫水、透明等制片前必需將組織中的鈣鹽用脫鈣劑除去，才能制成4~5 um厚的切片。目前，常用的脫鈣劑有單純酸類、混合酸類、螯合劑、離子交換樹脂和電解脫鈣等方法。

操作方法：

（1）取材
     樣本如股骨頭、牙齒、病變骨、碎骨組織等，針對不同的樣本采用骨鉗或骨鋸將其鋸成厚度不超過0.5 cm的骨片，剝去骨組織周圍的軟組織。
（2）固定
    將處理好的骨片放入固定液中固定12－24 h。
（3）脫鈣
     樣本固定好之后，將其放入脫鈣液中脫鈣一定時間，時間依據脫鈣液和標本而定。
（4）脫鈣結束
    用細針輕刺可進入而不感到阻力，判定脫鈣結束。脫鈣后的組織經流水沖洗后，行常規石蠟切片。
注意事項：

骨組織經10%福爾馬林固定好后進行脫鈣，未經固定的組織在脫鈣液中易受損傷，骨組織過大或過厚，脫鈣時間較長，可能1-2個月，若長時間浸于強酸脫鈣液中會影響切片、染色效果。因此，在不影響診斷的條件下，應將骨組織周圍的組織剝離。
優質脫鈣劑的標準是：脫鈣充分、不損傷骨組織細胞或纖維、不影響后續染色(如HE染色、免疫組化等)、脫鈣速度不易過長。

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