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石蠟包埋
服務原理:
石蠟制片法是將材料經固定、脫水、透明、浸蠟后包埋在石蠟里面進行切片的方法。此法適用范圍廣,制片手段完備,能將材料切成極薄的片子(可切至2-8微米左右),并能制成連續的片子,這是其它制片法難以達到的,因此在光學顯微鏡的制片技術上它是zui常用的一種方法。除了一些經不住石蠟切片法中所應用的各種藥劑處理的材料不能應用石蠟切片以外,一般的材料都可以用此法制片。
服務流程:
一.脫水
酒精是制片zui常用的試劑,可與水互溶,酒精的脫水能力較強,對于組織會有明顯的收縮作用。因此用酒精作為脫水劑時,應先從低濃度酒精開始,濃度遞增,這樣可以避免組織過度收縮。目前有些脫水機具備震搖功能,這樣可加快脫水進程。
二. 透 明
組織脫水后,要經過浸蠟透明的過程,使石蠟滲透到組織中去,達到包埋的支持作用。由于脫水劑如酒精與石蠟不溶,因此必須使用一種與酒精和石蠟都互溶的媒劑將酒精置換掉,待酒精*被*取代后,組織成透明狀態,即透明。
三. 浸 蠟
透明后即可將組織浸入溶解的石蠟進行浸蠟,石蠟逐漸浸入組織間隙,取代透明劑,這一過程叫浸蠟。石蠟的質量和熔度與切片質量密切相關,所用的石蠟有一定的熔點和硬度。
四. 包 埋
包埋,就是將浸蠟的組織塊從溶解的石蠟中取出,放入充滿熔融石蠟的包埋框內,使組織和包埋劑相熔并迅速冷卻的過程。包埋劑凝固后,加強了組織的硬度和韌度,從而利于切片。
五. 石蠟切片
在包埋以后,就可進行切片。包埋好的石蠟塊裝在切片機上,進行固著整修,通常切片厚度為3-5um,注意切片速度不宜太快,防止切片機震動厲害引起切片厚薄不均勻。切好的切片須貼附于載玻片上,一般采用撈片法,但切片常有細小的橫紋,必須經展平后才能貼附,否則影響染色和觀察。
組織切片是無色透明的,必須進行染色后才能觀察到各種微細結構,染色后的切片須再次經過脫水、透明、中性樹脂封片,待封藏劑凝固后便成為一張成功的石蠟切片。
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