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線粒體膜電位檢測
服務介紹:
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)是一種以JC-1 為熒光探針,快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于早期的細胞凋亡檢測。
服務目的:
通過檢測線粒體膜電位變化鑒定樣品的凋亡情況
服務原理:
JC-1為陽離子脂質熒光染料,有單體和多聚體兩種存在狀態,兩者的發射光譜不同。正常健康線粒體的膜電位(△y)具有極性,JC-1依賴于△y的極性被迅速攝入線粒體內,并因濃度增高而在線粒體內形成多聚體,多聚體發射光為紅色熒光;而細胞發生凋亡時,線粒體跨膜電位被去極化,JC-1從線粒體內釋放,紅光強度減弱,以單體的形式存在于胞質內,發綠色熒光。
服務流程:
1、細胞重懸于0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。;
2、用適當的方法誘導細胞凋亡,同時設立陰性依照組合陽性對照組,收集細胞;
3、用PBS洗滌細胞三次,收集不多于1×106的細胞;
4、加入0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中37℃孵育20 分鐘。
5、在孵育期間,按照每1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
6、37℃孵育結束后,600g 4℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
7、用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌2 次:加入1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細 胞,600g 4℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g4℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
8、再用適量JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用流式細胞儀分析。
服務說明:
1、檢測細胞株(若實驗室有,可共享)。
2、待測毒性藥物(根據實驗方案有無)。
3、實驗設計方案或參考文獻。
4、若另有疑問歡迎向本公司咨詢,我們將竭誠為您服務。
收費標準/服務周期/提供結果:
詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。
【本公司合作項目】
慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動物實驗,蛋白組學實驗等,能夠進行藥效學評價、毒理學評價、細胞藥篩、動物建模、病理檢測、蛋白組學、代謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學分析服務!
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